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1．研究背景和目的CXCL1又被称作GRO-α，属CXC趋化因子家族【1】，早期研究发现CXCL1在很多肿瘤的的发生、生长、发展、增殖、侵袭、迁移、血管新生、淋巴管新生、淋巴转移、转化等过程中发挥关键作用【2】。然而目前趋化因子CXCL-1与肝癌的发生发展间的关系报道甚少，本实验将更深入的研究目的基因CXCL-1对肝癌生长，增殖，迁移，侵袭及转移的影响和作用的机制，我们应用第三代慢病毒系统介导【3-5】的基因转染技术作用于肝癌细胞系MHCC97L（简称97L），阐明目的基因CXCL-1在肝癌增殖、侵袭、迁移，转移中的主要作用，讨论CXCL-1作为肝癌分子靶点的可行性，为肝癌患者早期的诊断、治疗及预后评价奠定理论的基础。2．方法利用前期实验室已经构建的慢病毒感染97L细胞，筛选出稳定表达目的基因的细胞，扩大培养，荧光定量PCR、蛋白免疫印迹等方法检测转染CXCL-1后，97L细胞中靶基因在转录和翻译两个层面的表达；利用细胞单克隆形成实验、MTT比色法、流式细技术检测细胞周期来研究CXCL-1对细胞体外生长增殖能力的影响；利用Transwell小板实验检测目的基因CXCL-1对肝癌细胞迁移能力和侵袭能力的影响。实验所得的数据用SPSS16.0软件包进行数据分析，用重复测量单因素方差分析对比转染前后肝癌细胞株荧光定量PCR、细胞功能试验（包括MTT、胞单克隆形成实验、流式细胞技术检测细胞周期）、Transwell迁移及侵袭实验是否具有显著性差异，P小于＜0．05为有统计学意义3．结果带目的基因的慢病毒载体转染低转移潜能的肝癌细胞株97L，并设立对照，实验分组后将其命名为CXCL-1/97L,GFP/97L,未经任何处理的细胞为97L。 MTT法观察稳定表达CXCL-1基因后体外细胞的增殖情况，细胞在4个时间点（24、48、72、96小时）增殖速度显著增强（P＜0.05）；细胞单克隆形成实验结果也显示CXCL-1/97L细胞的活性明显较其他两对照组强(P＜0.01)，细胞周期检测结果显示出CXCL-1/97L细胞中G1期细胞数量比例减少，G2期比例明显较其他两对照组增加(P＜O.05)，结果均说明过度表达的CXCL-1能显著增强肿瘤细胞体外生长能力。体外迁移侵袭小室实验检测稳定表达目的基因后细胞迁移和侵袭能力的改变， CXCL1/97L细胞的侵袭能力较对照组明显增加，差异具有统计学意义(P＜0.01)。CXCL1/97L细胞的迁移能力较对照组无明显差异（P＞0.05）。这些结果表明CXCL-1表达水平增加显著增强肝癌细胞侵袭能力，但对其迁移能力无影响。4.结论我们选择LV介导的转染系统，构建了稳定并高度表达靶基因CXCL-1的肝癌细胞系，后期在体外细胞功能的研究中，可以发现靶基因CXCL-1可能是肝癌生长、增殖、侵袭的促进基因。