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背景高血压是一种影响全球约11.3亿人的心血管系统疾病,其病理生理机制复杂且受多种因素影响,其中血管的收缩和舒张功能与高血压的发生发展密切相关。目前,越来越多的研究证实了成人心血管疾病的胎儿起源理论,即在胎儿发育的关键时期,妊娠期的母亲暴露于高盐、高糖、高脂肪、低蛋白饮食等各种不良环境,会对子代的心血管发育产生长期且不可逆的影响,导致子代成年后罹患高血压等心血管疾病的风险增加。研究显示孕期不利因素暴露致子代心血管功能异常的表型存在性别差异。我们的前期研究也发现,孕期高脂肪饮食（high-fat diet,HFD）导致子代成年雄鼠血管功能异常,而对雌性无明显影响,其机制有待深入研究。数据显示,在18-39岁和40-59岁的人群中,男性高血压患病率均高于女性,但女性绝经后高血压的发病率急剧增加,在60岁以上人群中,男性的患病率反而低于女性,表现出明显的性别差异。多项研究表明,高血压表现出的性别依赖可以很大程度上归因于雌激素,雌二醇（17β-estradiol,E2）与心血管系统疾病的性别依赖现象具有很强的相关性。同时,我们的研究也得到了相似的结论,雌激素在孕期HFD诱导的成年子代心肌肥厚胎儿程序化的性别差异中起关键作用。因此我们推测,雌激素改善孕期HFD引起的子代血管功能异常,进而导致性别差异的产生。本研究在妊娠期HFD模型的基础上,重点探讨E2在妊娠期HFD致子代性别依赖性血管功能异常中的潜在作用及相关机制。方法育龄SD大鼠雌雄合笼,阴道涂片确认雌鼠准确受孕时间。将孕鼠随机分为两组,分别在孕期给予正常饲料（ND）和高脂饲料（HFD）。雌性子代8周龄时,分别进行假手术（Sham）、卵巢切除术（OVX）和卵巢切除术后雌二醇替代。待其3月龄成年,取胸主动脉进行研究。实验动物共分为6组:（1）ND-Sham组,（2）HFD-Sham组,（3）ND-OVX组,（4）HFD-OVX组,（5）ND-OVX-E2组,（6）HFD-OVX-E2组。ELISA定量测定血浆E2水平。离体主动脉环实验检测6组大鼠的胸主动脉在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导下的收缩作用以及氯沙坦和PD123319预处理对其收缩作用的影响。同样的方法,检测苯肾上腺素（phenylephrine,PE）预收缩后,乙酰胆碱（acetylcholine,ACh）和硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）的血管扩张作用。Western Blot检测大鼠胸主动脉AT1R和AT2R蛋白表达水平。RT-q PCR检测AT1aR、AT1bR、AT2R m RNA水平。焦磷酸测序法定量测定AT1aR、AT2R启动子Cp G位点甲基化水平。结果1.与Sham组对比,雌鼠去势后血浆E2水平明显下降（P＜0.05）,去势后给予雌激素替代,血浆E2水平恢复到正常范围内（P＜0.05）。2.主动脉环收缩实验结果显示,与Sham组相比,孕期HFD导致OVX组子代AngⅡ诱导血管收缩作用明显增强,Emax显著上升（P＜0.05）,给予E2替代明显抑制OVX组子代AngⅡ诱导血管收缩。氯沙坦预处理后,所有组别AngⅡ诱导的血管收缩作用都明显被阻断（P＜0.05）,而PD123319预处理后并未引起血管收缩性的明显变化。3.主动脉环舒张实验结果显示,孕期HFD导致OVX组子代ACh介导的血管最大舒张明显减弱（P＜0.05）,给予雌激素能够显著改善其血管舒张作用。相反,孕期HFD对内皮非依赖性血管扩张剂SNP介导的血管舒张作用没有显著影响。4.胸主动脉Western Blot结果显示,与ND-Sham组相比,HFD-Sham组子代AT1R和AT2R蛋白水平明显升高（P＜0.05）,导致AT1R/AT2R比值无明显差异;与ND-OVX组相比,HFD-OVX组子代AT1R蛋白水平显著升高（P＜0.05）,AT2R无明显改变,导致AT1R/AT2R比值明显增大;给予E2后,明显逆转这一变化,与ND-OVX-E2组相比,HFD-OVX-E2组子代AT1R/AT2R比值无明显差异。5.胸主动脉RT-q PCR结果显示,与ND-Sham组相比,HFD-Sham组子代AT1aR和AT2R m RNA水平都明显升高（P＜0.05）,AT1bR无明显变化;与ND-OVX组相比,HFD-OVX组子代AT1aR m RNA水平明显增加（P＜0.05）,AT2R和AT1bR均无明显变化;给予E2替代后,孕期HFD引起的m RNA水平变化被阻断,与ND-OVX-E2组相比,HFD-OVX-E2组子代AT1aR、AT2R m RNA水平明显升高（P＜0.05）,AT1bR无明显变化。6.孕期HFD显著降低了了OVX组子代血管AT1aR启动子上Sp1转录因子结合位点（-96）、CREB结合位点（-150）、ERα和β结合位点（-484）甲基化水平（P＜0.05）,同时对AT1aR启动子上GATA-1结合位点（-809）和AT2R启动子上GRE位点（+11）、TATA位点（-52）、CREB位点（-444）的甲基化水平无显著影响。结论本研究表明,雌激素通过DNA甲基化途径调控孕期高脂饮食所致切除卵巢子代的AngⅡ受体表达量变化,从而对成年雌性子代血管功能产生性别特异的保护作用,证实了雌激素在孕期高脂饮食致子代性别依赖性血管功能异常中的关键作用。