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目的:观察淫羊藿苷(Icariin,ICA)对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法:不同浓度淫羊藿苷(0、12.5、25、50、100、200μg/mL)干预人肝癌HepG2细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定24、48、72h时间点细胞增殖变化,流式细胞术分析48h细胞周期变化,Hoechst 33258染色法观察48h细胞凋亡情况,Annexin V-FITC/PI双染法检测48h细胞凋亡率;Western blot法检测48 h细胞凋亡线粒体途径相关Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2和Bax蛋白表达变化。结果:1.淫羊藿苷抑制人肝癌HepG2细胞增殖:MTT结果表明,12.5、25、50、100、200μg/m L的淫羊藿苷可明显抑制HepG2细胞增殖,与对照组相比,有统计学差异(P<0.05),且随浓度升高,抑制作用增强(P<0.05)。经淫羊藿苷干预HepG2细胞48h后倒置显微镜下观察发现:细胞贴壁性差,细胞形态不规则,数量减少,部分细胞形态变圆;2.淫羊藿苷可诱导HepG2细胞周期阻滞:通过PI染色后流式细胞仪测定结果提示25、50、100μg/m L的淫羊藿苷干预HepG2细胞48h,细胞周期G0/G1细胞明显增多(P<0.05),50、100μg/mL干预的细胞S期和G2/M期细胞明显减少(P<0.05)。3.淫羊藿苷可诱导HepG2细胞凋亡:经12.5、25、50、100、200μg/mL的淫羊藿苷作用于HepG2细胞48h后,Hoechst 33258染色结果显示随着药物浓度增加,细胞凋亡有明显变化;25、50、100μg/mL淫羊藿苷作用细胞48h后,Annexin V-FITC/PI检测结果显示其细胞总凋亡率分别为6.33%±0.78%、16.06%±1.22%、22.38%±1.83%,与对照组比较有统计学差异(P<0.05),并随剂量增加,凋亡增加(P<0.05)。4.Western blot:25、50、100μg/mL淫羊藿苷作用于HepG2细胞48h后,促凋亡蛋白Bax上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,Bax/Bcl-2的比值上升,与对照组比较均有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡信号因子Caspase-3、Caspase-9表达上调,50、100μg/m L与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:1.淫羊藿苷可抑制人肝癌HepG2细胞增殖,并使细胞周期在G1期停滞。2.淫羊藿苷可诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,促使Bax/Bcl-2蛋白表达比值上调,促使Caspase-3、Caspase-9蛋白表达上调,提示淫羊藿苷诱导HepG2凋亡机制和线粒体凋亡途径密切相关。