针刺长强穴对自闭症大鼠海马NLGN-3蛋白表达的影响

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目的:观察针刺长强穴对自闭症大鼠海马NLGN-3蛋白表达的影响。方法:(1)选取清洁级Wistar雄性及雌性大鼠各10只。采用Wistar大鼠,在妊娠第12.5天时,腹腔注射VPA制作子代autism大鼠模型。VPA模型组24只,空白对照组(A组)8只。两组幼鼠的发育情况进行体重测定和方向趋向性机能检测,行为学进行伤害知觉测试;将VPA组中的24只幼鼠通过随机数字表法分为模型对照组(B组)8只,长强治疗组(C组)8只,非穴治疗组(D组)8只。(2)C组和D组在幼鼠断乳后次日进行针刺治疗,C组选取长强穴,D组选取非穴。针刺穴位深度约0.3寸,进针后行平补平泻提插手法,频率约为160-200次/分钟,持续一分钟。每日针刺1次,10天为一个疗程,一个疗程结束后休息2天再针刺,连续针刺3个疗程。正常对照组(A组)与模型对照组(B组)仅模拟针刺组抓取动作,余同前。干预疗程结束后次日,各组实验大鼠进行水迷宫测试,并在水迷宫测试后第二天取脑,通过免疫组织化学技术检测脑组织海马NLGN-3阳性细胞灰度值。实验数据采用单因素方差分析及相关性分析。结果:(1)子代幼鼠发育情况测定:①体重测定:空白对照组PN7(14.21±1.85).VPA模型组PN7(13.98±1.83),空白对照组PN14(25.34±2.80).VPA模型组PN14(25.64±2.41),空白对照组PN21(37.4PN21(37.4±3.28),VPA模型组(36.62±3.61).PN7p=0.489>0.05;PN14p=0.895>0.05;PN21p=0.371>0.05均无统计学意义;②方向趋向性测试:空白对照组PN7(152.34±47.54)、VPA模型组PN7(228.50±98.42);空白对照组PN8(130.81±42.60)、VPA模型组PN8(192.46±76.42);空白对照组PN9(78.16±38.25).VPA模型组PN9(139.07±79.61);空白对照组PN10(55.04±31.57).VPA模型组PN10(108.68±94.72).PN7p=0.001<0.0;PN8p=0.0500<0.05;PN9p=0.000<O.05; PN10p=0.000<0.05均有显著差异,空白对照组各时间段方向趋向性均优于VPA模型组。(2)伤害知觉测试:在PN9(p=0.010<0.05).PN11(p=0.003<0.05).PN13(p=0.000<0.05)及PN15(p=0.269>0.05)时,VPA模型组痛阈高于空白组,且在PN9.PN11.PN13时有显著性差异。在PN15时两组差异无统计学意义。(3)水迷宫测试:①针刺干预后平均逃避潜伏期分别为A组(13.64±1.72)、B组(30.32±8.32)、C组(14.56±3.05)、D组(26.78±5.34)。A、C组平均潜伏时期明显短于B组(P<0.05),有统计学意义;②针刺干预后水迷宫第五天穿越平台次数分别为:A组(2.25±0.46)、B组(0.87±0.64)、C组(1.87±0.64)、D组(0.87±0.35)。A、C组穿越平台次数明显多于B组(P<0.05),有统计学意义。(2)海马NLGN-3蛋白阳性细胞灰度值检测结果:A组(137.76±6.65)、B组(189.14±8.59)、C组(175.05±6.71)、D组(187.67±8.66)。A、D组明显少于C组(P<0.05)。(3)针刺干预后长强组实验数据相关性分析:①平均逃避潜伏期与海马NLGN-3阳性细胞灰度值正相关(r=0.928,P<0.05);②穿越平台次数与NLGN-3阳性细胞灰度值负相关(r=-0.838,P<0.05)。结论:(1)针刺长强穴可提高VPA大鼠学习记忆能力。(2)针刺长强穴可使VPA大鼠海马NLGN-3蛋白的表达上调。(3)针刺长强穴改善VPA大鼠学习记忆能力与增强海马NLGN-3蛋白表达成正相关
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