【摘 要】
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目的:研究小剂量氢化可的松(hydrocortisone，HC)对内毒素(E.colilipopoly-saccharide，LPS)诱导的脓毒症大鼠早、晚期炎症介质及脑病理损伤的影响，并探讨核因子κB(NF-κB)信号转
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目的:研究小剂量氢化可的松(hydrocortisone，HC)对内毒素(E.colilipopoly-saccharide，LPS)诱导的脓毒症大鼠早、晚期炎症介质及脑病理损伤的影响，并探讨核因子κB(NF-κB)信号转导系统在发病机制中的作用。
方法:1、动物模型的建立：右下腹腔注射LPS0555B5(1mg/kg)建立脓毒症大鼠模型，干预组注射LPS后立即尾静脉注射HC6mg/kg，分别在注射后2、8、16、24小时取材。对照组分别于腹腔和尾静脉注射与LPS及HC等量的生理盐水。
2、分组：雄性Wistar大鼠，随机分为三组：对照组(A组)、模型组(B组)、小剂量HC干预组(C组)。B组和C组设立2、8、16、24小时4个时点，分别为B2、B8、B16、B24、C2、C8、C16、C24组。
3、72只大鼠每组8只，麻醉、固定，分离右颈总动脉，连接多功能监护仪，检测平均动脉压、呼吸、心率。
4、采集上述各组大鼠血清，采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测各时点血清TNF-α和IL-1β含量。
5、采集上述各组大鼠海马组织5mg制备细胞总蛋白质，进行蛋白质电泳(SDS-PAGE)及蛋白免疫印迹分析，检测HMGB1水平。
6、54只大鼠每组6只，麻醉并灌注固定取脑。冰冻切片，采用SP法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-κB，IκB的表达。
7、尼氏染色取材方法同免疫组化法。OlympusVANOX-T多功能图像分析系统摄片和观察海马组织病理变化。
8、9只大鼠每组1只，灌注固定后取脑皮质并修块为1×1×1mm3大小，透射电镜观察超微结构变化和摄片。
结果1、B组大鼠行为学改变较A组明显，表现为嗜睡、拒食、呼吸增快、竖毛、体重下降；平均动脉压下降，尤B2组明显(P＜0.05)；呼吸、心率增快以B2、B8组明显(P＜0.05)；血清TNF-α、IL-1β水平均以B2组为高(P＜0.05)；脑海马组织HMGB1含量以B16、B24为高(P＜0.05)；尼氏染色病理变化明显；电镜结果显示B2组即开始出现变化，以后各组加重；NF-κB表达较A组显著上调，以B8组最高(P＜0.05)，IκB表达先降低后逐步上升，较A组也明显增加，以B24组为高(P＜0.05)。
2、C组：行为学改变、尼氏染色、超微结构改变较B组轻；平均动脉压回升，C2组较B2组有显著差异(P＜0.05)；呼吸频率下降，C2、C8组有显著差异(P＜0.05)；心率下降，C2组差别有显著性(P＜0，05)；血清TNF-α、IL-1β水平下降，以C2组明显(P＜0.05)；海马HMGB1含量较B组减少，以C16、C24组为著(P＜0.05)；海马NF-κB表达较B组显著下调，以C2、C8组为著(P＜0.05)；IκB表达较B组明显增加，以C8、C16、C24组为著(P＜0.05)。
结论1、本实验腹腔注射LPS1mg/kg成功建立严重脓毒症大鼠模型。
2、小剂量HC可改善脓毒症症状，升高血压，减慢心率、呼吸等；减轻脑组织炎症反应，减轻脑水肿及病理损伤。
3、脑组织炎症反应过程中NF-κB活化明显，HC可抑制其活化。
4、小剂量HC对炎症介质TNF-α、IL-1β、HMGB1有明显抑制作用。抑制炎症介质是通过诱生IκB从而抑制NF-κB的表达实现。
5、NF-κB/IκB信号转导系统在脓毒症发病机制中起重要作用。
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