艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)所引起的造成人类免疫系统缺陷的恶性传染病。本文基于荧光微球免疫层析技术,旨在针对HIV-1 P24抗原和HIV-1抗体建立一种快速、高效、价格低廉且无需专业人员操作的检测方法。HIV-1 P24抗原检测部分根据免疫层析技术中的双抗体夹心原理,通过试纸条检测线(T线)与质控线(C线)的峰面积比值与样本中的P24浓度成正比,从而实现血清样本中P24抗原的定量检测。实验筛选出了最佳抗体配对,并优化了荧光微球的标记方法、T线包被浓度以及检测条件。经过实验表明,P24抗原荧光微球免疫层析试纸条的检测下限为3.4 pg/m L,检测线性宽度为3.4 pg/m L～10ng/m L,且滴加样品后15 min可以得到检测结果。批内平均回收率为96.5%,批间平均回收率为97.3%,有较高的准确度。批内CV为5.4%～8.6%,批间CV为8.5%～11.0%,符合生产要求。通过与ELISA方法的对比得出,荧光微球免疫层析法的P24抗原检出率高于ELISA法10.6%、无错检情况发生且定量线性宽度宽于ELISA法。在ELISA定量范围内,荧光微球免疫层析法与其有较好的相关性(R~2=0.9393)。HIV-1抗体检测部分根据免疫层析技术中的双抗原夹心原理,通过试纸条检测线(T线)与质控线(C线)的峰面积比值高于检测下限的数值实现血清样本中HIV-1抗体的定性检测。实验中对荧光微球的标记方法、T线包被浓度、复溶液配方以及检测条件进行了优化。经实验表明,HIV-1抗体荧光微球免疫层析试纸条的检出率为100%,且滴加样品后20 min可以得到检测结果。批内CV为3.9%～9.8%,批间CV为8.6%～13.2%,符合生产要求。该方法的临床样本检出率与ELISA法持平,但将样本连续稀释后,当稀释倍数为10~5时ELISA法检测结果由阳转阴,而荧光微球免疫层析法稀释倍数为10~7依然可以检出阳性,因此该方法比起ELISA法灵敏度更高。本研究以荧光微球作为标记物,将其与免疫层析技术相结合,通过建立反应体系、优化标记条件、优化检测体系的方式,建立了一种HIV-1抗原抗体的快速检测方法。该荧光微球免疫层析试纸条具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、操作简便等优点。基于荧光微球免疫层析原理建立的HIV-1抗原抗体快速检测方法为实现早期快速检测HIV-1提供了新的技术方案,并为未来该方法的应用提供了技术思路和数据支持。