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目的:建立人淋巴瘤细胞株Raji体外摄取18F-FDG和18F-FLT实验研究的方法学,研究化疗药物对Raji细胞摄取18F-FDG的影响以及18F-FDG和18F-FLT PET/CT淋巴瘤显像的初步临床应用,探索两种PET显像剂在淋巴瘤诊治中的应用价值。
方法:(1)在不同条件下测定淋巴瘤细胞株Raji对18F-FDG和18F-FLT的细胞结合率:细胞数量1×105~1 X107/瓶;18F-FDG和18F-FLT的放射性活度1.85~29.6KBq;反应时间20~120min;葡萄糖浓度0~11.1mmol/L;(2)四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定加入不同剂量100~1600μg/L美罗华和30~480μg/L长春新碱48h后细胞抑制率及IC50,测定加入IC50剂量的美罗华和长春新碱12、24及48h后18F-FDG细胞结合抑制率;(3)免疫组化染色测定Raji细胞GLUT-1阳性细胞表达率。(4)6例淋巴瘤患者行18F-FDG和18F-FLT PET/CT检查,其中NHL3例,HL3例,均经活检病理确诊。分析18F-FDG和18F-FLT探及阳性病灶数及其最大标准摄取值(SUVmax)。
结果:(1)每瓶1×107个细胞、加入3.7KBq18F-FDG、葡萄糖浓度在0~2.78mmol/L、作用100min,18F-FDG细胞结合率达到(50.42±1.07)%:每瓶1 X107个细胞、加入3.7KBq18F-FLT、作用100min,18F-FLT细胞结合率达到(59.48±0.77)%;18F-FDG和18F-FLT的细胞结合率之间的差异具有统计学意义(p<0.01);(2)美罗华浓度为100、200、400、800和1600μg/ml时,抑制率分别为(13.54±0.03)%、(13.53±0.01)%、(16.48±0.01)%、(15.05±0.01)%、(15.41±0.008)%;长春新碱浓度为30、60、120、240和480μg/ml时,抑制率分别为(76.80%±0.01)、(79.58%±0.01)、(84.98%±0.01)、(96.53%±0.01)、(97.38%±0.003),IC50为29.17μg/ml。400μg/ml美罗华作用Raji细胞12、24、及48h后,18F-FDG细胞结合抑制率分别(10.05±0.010)%、(16.55±0.006)%和(12.44±0.010)%;29μg/ml长春新碱作用12、24、及48h后,细胞结合抑制率分别为(25.43±0.020)%、(51.85±0.002)%和(61.32±0.006)%;(3)免疫组化染色对照组Raji细胞GLUT-1阳性细胞表达率为(91.17±2.03)%,;美罗华干预后12、24及48h阳性细胞表达率分别为(80.47±0.69)%、(81.03±1.96)%(82.17±2.15)%:长春新碱组12、24及48h阳性细胞表达率分别为(42.9±3.15)%、(37.91±1.69)%(36.09±2.03)%。实验组阳性细胞表达率均低于对照组(p<0.05),美罗华干预后,阳性细胞表达率随时间增长未见明显降低,12、24及48h阳性细胞表达率之间差异无统计学意义,长春新碱阳性细胞表达率较对照组明显降低,12h与24及48h之间差异有统计学意义(p<0.05),24和48h组之间差异无统计学意义(p=0.359)。长春新碱作用于细胞后,GLUT-1阳性细胞表达率与18F-FDGN胞结合抑制率呈负相关(r=0.832,p=0.003),美罗华作用于细胞后,GLUT-1阳性细胞表达率与18F-FDG细胞结合抑制率无明显相关关系(p>0.05)。(4)6例淋巴瘤患者18F-FDG和18F-FLT显像全部阳性,18F-FDG和18F-FLT均探及阳性病灶18处,18F-FDG SUVmax:3.21~12.17,平均SUV:7.04;18F-FLT SUVmax:2.14~6.56,平均SUV:4.0,18F-FLT阳性病灶探测数与18F-FDG的符合度为100%。
结论:1.Raji细胞与18F-FDG和18F-FLT的结合率均与细胞数量、作用时间有关,与放射性活度无关;同等条件下,Raji细胞对18F-FLT的细胞结合率高于18F-FDG;2.美罗华在体外对Raji细胞的抑制作用轻微,长春新碱对Raji细胞有明显的抑制作用并随时间延长而增强,且与GLUT-1的表达相关;3.临床对淋巴瘤病灶的探测中18F-FLT与18F-FDG有较高的符合度,但是18F-FLT的图像质量略逊于FDG,SUV值偏低,与体外细胞结合实验结果不符。
方法:(1)在不同条件下测定淋巴瘤细胞株Raji对18F-FDG和18F-FLT的细胞结合率:细胞数量1×105~1 X107/瓶;18F-FDG和18F-FLT的放射性活度1.85~29.6KBq;反应时间20~120min;葡萄糖浓度0~11.1mmol/L;(2)四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定加入不同剂量100~1600μg/L美罗华和30~480μg/L长春新碱48h后细胞抑制率及IC50,测定加入IC50剂量的美罗华和长春新碱12、24及48h后18F-FDG细胞结合抑制率;(3)免疫组化染色测定Raji细胞GLUT-1阳性细胞表达率。(4)6例淋巴瘤患者行18F-FDG和18F-FLT PET/CT检查,其中NHL3例,HL3例,均经活检病理确诊。分析18F-FDG和18F-FLT探及阳性病灶数及其最大标准摄取值(SUVmax)。
结果:(1)每瓶1×107个细胞、加入3.7KBq18F-FDG、葡萄糖浓度在0~2.78mmol/L、作用100min,18F-FDG细胞结合率达到(50.42±1.07)%:每瓶1 X107个细胞、加入3.7KBq18F-FLT、作用100min,18F-FLT细胞结合率达到(59.48±0.77)%;18F-FDG和18F-FLT的细胞结合率之间的差异具有统计学意义(p<0.01);(2)美罗华浓度为100、200、400、800和1600μg/ml时,抑制率分别为(13.54±0.03)%、(13.53±0.01)%、(16.48±0.01)%、(15.05±0.01)%、(15.41±0.008)%;长春新碱浓度为30、60、120、240和480μg/ml时,抑制率分别为(76.80%±0.01)、(79.58%±0.01)、(84.98%±0.01)、(96.53%±0.01)、(97.38%±0.003),IC50为29.17μg/ml。400μg/ml美罗华作用Raji细胞12、24、及48h后,18F-FDG细胞结合抑制率分别(10.05±0.010)%、(16.55±0.006)%和(12.44±0.010)%;29μg/ml长春新碱作用12、24、及48h后,细胞结合抑制率分别为(25.43±0.020)%、(51.85±0.002)%和(61.32±0.006)%;(3)免疫组化染色对照组Raji细胞GLUT-1阳性细胞表达率为(91.17±2.03)%,;美罗华干预后12、24及48h阳性细胞表达率分别为(80.47±0.69)%、(81.03±1.96)%(82.17±2.15)%:长春新碱组12、24及48h阳性细胞表达率分别为(42.9±3.15)%、(37.91±1.69)%(36.09±2.03)%。实验组阳性细胞表达率均低于对照组(p<0.05),美罗华干预后,阳性细胞表达率随时间增长未见明显降低,12、24及48h阳性细胞表达率之间差异无统计学意义,长春新碱阳性细胞表达率较对照组明显降低,12h与24及48h之间差异有统计学意义(p<0.05),24和48h组之间差异无统计学意义(p=0.359)。长春新碱作用于细胞后,GLUT-1阳性细胞表达率与18F-FDGN胞结合抑制率呈负相关(r=0.832,p=0.003),美罗华作用于细胞后,GLUT-1阳性细胞表达率与18F-FDG细胞结合抑制率无明显相关关系(p>0.05)。(4)6例淋巴瘤患者18F-FDG和18F-FLT显像全部阳性,18F-FDG和18F-FLT均探及阳性病灶18处,18F-FDG SUVmax:3.21~12.17,平均SUV:7.04;18F-FLT SUVmax:2.14~6.56,平均SUV:4.0,18F-FLT阳性病灶探测数与18F-FDG的符合度为100%。
结论:1.Raji细胞与18F-FDG和18F-FLT的结合率均与细胞数量、作用时间有关,与放射性活度无关;同等条件下,Raji细胞对18F-FLT的细胞结合率高于18F-FDG;2.美罗华在体外对Raji细胞的抑制作用轻微,长春新碱对Raji细胞有明显的抑制作用并随时间延长而增强,且与GLUT-1的表达相关;3.临床对淋巴瘤病灶的探测中18F-FLT与18F-FDG有较高的符合度,但是18F-FLT的图像质量略逊于FDG,SUV值偏低,与体外细胞结合实验结果不符。