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目的研究慢病毒介导的骨桥蛋白RNA干扰对人U251胶质瘤细胞在裸鼠体内生长的影响并探讨其对胶质瘤生长、侵袭的可能机制,为胶质瘤的基因治疗提供新的靶点。方法应用RNA干扰技术,将已成功构建的针对人OPN基因的慢病毒干扰载体LV-OPNshRNA及对照组空载体LV-N-OPN分别感染U251细胞。将未感染组U251细胞、空载体感染组U251细胞(LV-N-OPN/U251)、LV-OPNshRNA慢病毒感染组U251细胞(LV-OPNshRNA/U251)分别接种于裸鼠皮下,建立裸鼠荷瘤模型。每天观察裸鼠活动情况及皮下移植瘤的生长,每3天测量皮下肿瘤大小。三周后断颈处死裸鼠,测量肿瘤的体积、瘤重。苏木素-伊红染色观察肿瘤组织病理形态学变化;半定量RT-PCR法和Western blot法分别检测OPN及相关分子uPA、MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白表达变化;免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度(MVD)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达情况。结果1.与未感染组、空载体感染组相比,LV-OPNshRNA/U251感染组裸鼠皮下肿瘤生长缓慢,肿瘤体积及重量均明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。2.苏木素-伊红染色结果显示,未感染组、空载体感染组肿瘤细胞异型性明显,侵袭能力强。3.半定量RT-PCR及Western blot结果表明,LV-OPNshRNA/U251感染组与其它两组相比,OPN的mRNA和蛋白表达均明显下降,同时uPA、MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白表达也明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。4.免疫组化实验显示,与其它两组相比,LV-OPNshRNA/U251感染组的MVD值和VEGF的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用慢病毒载体介导的RNA干扰技术,特异性地沉默U251细胞中OPN基因的表达,能够明显抑制人U251胶质瘤细胞在裸鼠体内的生长和侵袭。半定量RT-PCR、Western blot及免疫组化的结果表明OPN可能通过激活uPA、MMP-2和MMP-9等蛋白酶降解细胞外基质和促进肿瘤的血管生成,参与胶质瘤的生长和侵袭。本研究结果表明OPN基因有望成为胶质瘤治疗的新靶点。