拟南芥(Arabidopsis thaliana)早熟突变体的生理及基因功能研究

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研究人员筛选出11种对糖敏感的突变体和11种对糖较敏感的突变体,以此作为进一步分子生物分析的基础.efv1.1为拟南芥花早熟突变体.其形态矮小,开花时间提前.这种早熟突变是由于T-DNA的插入缺失造成的.缺失片断为1.2kb,影响到CD和TM两个基因.为弄清这两个基因中是哪一个基因的缺失造成早熟突变,通过T-DNA标签法进行形态恢复实验,将带有能将缺失的CD和TM基因补偿的拟南芥基因组DNA克隆(mva3)片段分别转化进早熟突变体efv1.1中.通过三代抗生素的筛选,选出符合孟德尔遗传规律的转化体.转化体efv.ss中T-DNA携带的基因片段能补偿缺失的CD基因的功能,其形态与野生型Ws的形态完全相同;而efv.et的形态与efv1.1相同,其转化进的植物基因组片段能将缺失的TM基因补偿.根据形态学分析,确定是CD基因的缺失造成的早熟突变.经PCR和Southern杂交证明了T-DNA的整合情况和插入的拷贝数.
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