研究目的：γδT细胞是参与宿主固有免疫应答的主要效应细胞,是桥联固有免疫和适应性免疫的桥梁。有研究报道,IL-17⁺γδT能够抑制调节性T细胞的增殖及功能。本研究利用TCRδ-/-小鼠探讨沙眼衣原体小鼠肺炎症中产生IL-17的γδT细胞对Treg细胞增殖的影响以及可能的作用机制,为γδT细胞与Treg细胞相互作用提供理论依据,也为固有免疫和适应性免疫的相互调节增添新的内容。研究方法：取6-δ周龄雌性WT（C57BL/6）和TCRδ^-/-（C57BL/6遗传背景）小鼠,经鼻吸入1×10³ IFU沙眼衣原体小鼠肺炎菌株（Chlymydia muridarum, Cm）,诱导小鼠沙眼衣原体肺炎。在感染的不同时间点处死小鼠,收集肺泡灌洗液,制备肺组织单个核细胞悬液,用荧光素标记的抗鼠CD3、γδT抗体染色,流式细胞仪检测γδT的增殖利用细胞内细胞因子染色技术检测肺组织CD3⁺γδT细胞及Vγ1和Vγ4γδT细胞亚群分泌IL一17水平；用ELISA方法检测WT和TCRδ-/-小鼠肺泡灌洗液中IL-17含量,探讨Cm呼吸道感染诱导的γδT细胞增殖及IL-17的产生。利用流式细胞术检测WT和TCRδ-/-小鼠脾脏及肺组织CD4⁺CD25⁺T及CD25⁺Foxp3⁺T细胞水平,确定沙眼衣原体呼吸道感染诱导的Treg细胞的增殖；进一步利用RT-PCR技术探讨WT和TCRδ-/-小鼠肺组织Treg细胞相应转录因子Foxp3 mRNA表达以及与Treg细胞活化及功能相关的细胞因子IL-2、TGF-β和IL-10 mRNA表达水平改变,从而探讨γδT细胞对Treg细胞增殖的影响以及可能的作用机制。实验结果：经鼻腔吸入一定剂量的Cm诱导小鼠沙眼衣原体肺炎及CD3⁺γδT⁺细胞在小鼠肺组织的增殖及产生大量IL-17。感染第1天CD3⁺γδT⁺细胞百分率即开始增高（*P<0.05）,于感染第7天达到高峰（***P<0.001）,随后降低,到感染第10天基本下降到未感染水平；细胞内细胞因子染色结果显示Cm感染诱导γδT细胞在感染第一天既分泌大量的IL-17（**P<0.01）,至感染第三天达到高峰（***P<0.001）,至感染后第五天γδT细胞产生IL-17的水平已显著降低（*P<0.05）。进一步我们对小鼠肺组织存在的两个重要的γδT细胞亚群Vγ1和Vγ4 IL-17的分泌进行了研究,结果显示Cm感染小鼠肺组织Vγ1基本不分泌IL-17,而Vγ4则分泌大量的IL-17,尤其是在感染第3天（***P<0.001）达到分泌高峰,随后迅速降低,至感染第10天降低至基础水平,其变化趋势与γδT细胞分泌IL-17一致。另外,我们的结果还证实,γδT细胞是感染早期IL-17的主要来源,TCRδ-/-小鼠肺泡灌洗液BAL中IL-17水平显著低于WT小鼠*P<0.05)。Cm感染能够诱导小鼠外周免疫器官及局部炎症部位Treg细胞增殖。与WT小鼠比较,TCRδ-/-小鼠脾组织Treg细胞百分率在感染后第3天显著升高（**p<0.01）,而感染第7天则显著降低（**p<0.01）；进一步肺组织中Treg相关转录因子Foxp3mRNA表达趋势与脾脏Treg细胞的变化一致（*P<0.05）,提示在Cm感染的不同时间点,γδT细胞通过不同的途径调节Treg细胞的增殖。进一步对其可能的调节机制进行研究,结果发现,感染后第3天WT和TCR6-/-小鼠肺组织Treg细胞活化因子IL-2 mRNA仅微量表达,而感染后第7天IL-2 mRNA在两组小鼠肺组织明显表达,且TCRδ-/-小鼠明显低于WT小鼠（**P<0.01）。肺组织Treg细胞功能性细胞因子TGF-p和IL-10的PCR结果显示感染第3天TCRδ-/-小鼠IL-10水平明显高于WT小鼠*P<0.05)而感染第7天IL-10分泌明显降低（*P<0.05）,与Treg细胞增殖变化一致,而肺组织TGF-β mRNA表达在两组小鼠未见明显差异。结论：Cm呼吸道感染诱导小鼠肺组织γδT细胞增殖并在感染早期分泌大量的IL-17,γδT细胞是感染早期IL-17的主要来源,其中Vγ4是分泌IL-17的主要γδT细胞亚群。Cm感染能够诱导小鼠外周免疫器官及局部炎症部位Treg细胞增殖,在Cm呼吸道感染中存在着γδT细胞对Treg细胞的免疫调节,但在感染的不同阶段调节机制不同,感染早期,γδT细胞可能通过分泌大量的IL-17抑制Treg细胞增殖,至感染中期IL-2的大量产生,可能是通过IL-2/IL-2R途径促进Treg细胞；在沙眼衣原体感染中,γδT细胞主要通过影响Treg细胞功能性细胞因子IL-10的表达介导Treg细胞的免疫抑制功能。