石决明散对小鼠干眼模型眼表损伤修复作用及作用机制研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:GXDZL126
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目的:观察石决明散对C57/BL6免疫缺陷型小鼠干眼模型眼表损伤的修复作用,并研究石决明散治疗干眼症的作用机制。材料与方法:选取健康的8周龄C57/BL6雌性小鼠50只(购自辽宁长生生物技术有限公司,编号SCXK(辽)2015-0001),筛选出35只,随机分为5组,分为空白对照组(N)、模型组(M)、石决明散灌胃组(S)、阳性药组(Cs A)、溶剂组(R)、每组各7只。运用智能干燥环境系统结合药物诱导将除空白对照组的28只C57/BL6自身免疫缺陷型小鼠造成干眼模型两周。同时将石决明散灌胃组(S)、阳性药组(Cs A)、溶剂组(R)、模型组(M)分别用石决明散水煎剂灌胃,0.05%的环孢素A(Cs A)滴眼,溶剂组采取蒸馏水灌胃两周,日两次。在第0天、14天,对各组动物运用荧光素钠染色法进行角膜上皮损伤检测、酚红棉线进行泪液分泌量检测、泪膜破裂时间检测。在第14天检测后,对眼球及眼睑附属器进行切除组织,并进行冰冻病理切片,通过PAS糖原染色进行结膜杯状细胞密度检测、运用TUNEL一步法进行角结膜上皮细胞凋亡检测、免疫荧光染色法进行角结膜CD4+T细胞浸润检测。结果:1.第14天,模型组(M)角膜上皮损伤程度,与空白组(N)比较具有显著性差异(P<0.05);石决明散灌胃组(S)角膜上皮损伤程度与模型组(M)比较具有显著性差异(P<0.05)。2.第14天,模型组(M)泪液分泌量与空白组(N)比较具有显著性差异(P<0.05);石决明散灌胃组(S)泪液分泌量与模型组(M)比较具有显著性差异(P<0.05)。3.第14天,模型组(M)泪膜破裂时间,与空白组(N)比较具有显著性差异(P<0.05);石决明散灌胃组(S)泪膜破裂时间与模型组(M)比较具有显著性差异(P<0.05)。4.第14天,运用PAS糖原染色进行结膜杯状细胞密度检测结果显示模型组(M)单位长度内的结膜杯状细胞密度,与空白组(N)比较具有显著性差异(P<0.05);石决明散灌胃组(S)的单位长度内杯状细胞密度与模型组(M)比较具有显著性差异(P<0.05)。5.运用TUNEL一步法进行角膜上皮细胞、结膜上皮细胞的凋亡检测,结果显示模型组(M)角膜、结膜在单位面积内的荧光强度与空白组(N)比较具有显著性差异(P<0.05);石决明散灌胃组(S)角膜、结膜在单位面积内的荧光强度与模型组(M)比较具有显著性差异(P<0.05)。6.免疫荧光染色法进行CD4+炎性T细胞检测结果显示模型组(M)CD4+T细胞单位面积内的荧光强度与空白组(N)比较具有显著性差异(P<0.05);石决明散灌胃组(S)单位面积内的荧光强度与模型组(M)比较具有显著性差异(P<0.05)。7.造模14天内无动物出现死亡。体重称量表明各组实验动物体重增长无影响(P>0.05)。结论:1.石决明散可以减轻C57/BL6干眼小鼠模型的眼表症状,对眼表有损伤修复作用。2.石决明散对干眼症有效可能的机制为保护结膜杯状细胞,抑制眼表细胞的凋亡,抑制眼表CD4+T细胞。
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