【摘 要】
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研究背景铀是一种新兴的环境污染物,肾脏是其最敏感的毒性靶器官,目前,常用的铀解毒剂毒副作用较大,而黄精作为传统中药和滋补类食品,有补充能量、滋养肾脏和抗氧化作用,是一种潜在无毒高效的抗铀致肾损伤药物,但其炮制工艺有待规范,具体抗损伤作用及其机制有待探明。目的确定黄精“九蒸九制”的炮制工艺,并进一步探究“九蒸九制”黄精对铀致肾损伤的保护作用及其潜在机制。方法以黄精多糖、浸出物、皂苷、总黄酮、总酚、氨
【基金项目】
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四川省重点研发项目(2019YFS0183); 中物院基金项目;
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研究背景铀是一种新兴的环境污染物,肾脏是其最敏感的毒性靶器官,目前,常用的铀解毒剂毒副作用较大,而黄精作为传统中药和滋补类食品,有补充能量、滋养肾脏和抗氧化作用,是一种潜在无毒高效的抗铀致肾损伤药物,但其炮制工艺有待规范,具体抗损伤作用及其机制有待探明。目的确定黄精“九蒸九制”的炮制工艺,并进一步探究“九蒸九制”黄精对铀致肾损伤的保护作用及其潜在机制。方法以黄精多糖、浸出物、皂苷、总黄酮、总酚、氨基酸、5-羟甲基糠醛的含量、体外抗氧化活性为指标,采用灰色关联度法,以熵权法所得权重为分辨系数(ρ)进行统计分析,结合性状综合评价黄精“九蒸九制”的最佳炮制工艺。采用细胞活力与凋亡分析、线粒体功能分析以及酶联免疫吸附试验,探究黄精多糖和水提液对铀致肾损伤的保护作用及其潜在的分子机制。结果0~9蒸黄精质量差异明显,随着炮制次数增加,黄精总黄酮、总酚、5-羟甲基糠醛含量明显上升,多糖、浸出物含量明显下降,氨基酸含量略有下降,皂苷含量无明显变化;体外抗氧化活性明显增强。黄精多糖和黄精水提液能显著提高铀染毒细胞活力,减轻细胞损伤,抑制细胞凋亡。此外,黄精多糖和黄精水提液能增加ATP含量、减少膜电位损失和活性氧水平,改善铀诱导的线粒体功能障碍。黄精多糖和黄精水提液不仅作为线粒体调节剂,能显著抑制细胞浆中Bax和Bcl-2的降低以及Caspase 9和Caspase 3的激活;黄精多糖和黄精水提液也可以作为抗氧化剂增加GSK-3β磷酸化,降低核内Fyn含量,增加Nrf2核易位。结论综合熵权法和灰色关联度法的评价结果及饮片性状,优选出五蒸五制为黄精理想的炮制方法。黄精作为抗氧化剂和线粒体调节剂,具有保护铀致肾损伤的潜力,这种保护作用归因于对Nrf2信号通路和线粒体凋亡通路的调控。
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