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目的 研究人支气管上皮细胞系BEP2D恶性转化过程中p16基因甲基化改变情况,以确定p16基因甲基化改变是否发生在肺癌形成的早期阶段。 方法 选取由军事医学科学院放射医学研究所提供的正常BEP2D细胞株及经α粒子照射20周(R-20),30周(R-30),35周(T-35)和54周(T-54)的BEP2D细胞株作为研究对象(其中R-20,R-30未发生恶性转化,而T-35,T-54已发生恶性转化),运用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测各细胞株中p16基因的甲基化改变情况,再运用RT-PCR检测p16蛋白mRNA在各细胞株中的表达,以验证p16基因甲基化以后p16蛋白表达是否确实失活。 结果 1正常BEP2D细胞株p16基因未发生甲基化改变,而R-20,R-30,T-35,T-54细胞的p16基因均发生了甲基化改变。2与正常BEP2D细胞相比,R-20,R-30,T-35,T-54细胞p16蛋白mRNA的表达均降低。 结论 1 p16基因甲基化改变发生在肺癌形成的早期阶段,并且在肺癌形成后仍继续保持。2 p16基因甲基化会导致p16蛋白表达降低。