目的：树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是体内功能最强大的专职抗原提呈细胞，能激发机体初次特异性免疫反应。然而，许多研究表明在肿瘤体内DCs的数量下降，并且功能受到了不同程度的抑制。DCs不能有效摄取、处理、提呈肿瘤抗原，使T淋巴细胞介导的免疫应答不能被有效激活。国、内外已有许多动物实验证明将DCs在体外诱导活化制备成DCs疫苗，然后回输治疗，可以诱导机体产生特异性CTL保护性免疫反应，促进肿瘤组织在动物机体内消失。最近，国外已有学者利用此方法在临床上治疗黑色素瘤，前列腺癌和肾细胞癌等肿瘤，取得初步疗效。但尚未见DCs疫苗用于胃癌的临床治疗。我们拟以胃癌为研究对象，观察肿瘤细胞对DCs体内、外影响，并在体外制备DCs疫苗，观察DCs疫苗治疗胃癌患者的初步疗效。 方法：第一部分，采用流式细胞术检测分析胃癌患者和正常人外周血DCs的免疫表型CD80、CD83和HLA-DR的表达。第二部分，将胃癌细胞系SGC7901上清体外作用DCs后，采用RT-PCR和ELISA法检测肿瘤上清作用前后DCs的IL-12表达，采用流式细胞术检测肿瘤上清作用前后DCs的免疫表型变化及凋亡的发生率。第三部分，从外周血诱导制备DCs疫苗，皮下注射治疗25例胃癌患者，初步观察DCs疫苗治疗前后胃癌患者迟发性超敏反应(DTH)，T淋巴细胞亚群，NK细胞，外周血清IFN-γ、IL-4的水平及外周血PBMC在自体肿瘤抗原刺激下分泌IFN-γ、IL-4的能力。 结果：1．胃癌患者外周血DCs免疫表型CD80、CD83和HLA-DR的表达率明显下降，且随着TNM分期的发展而逐渐严重。2．胃癌细胞在体外可诱导DCs发生凋亡，并且可明显抑制DCsIL-12的产生及免疫表型的表达。3．我们制备的DCs疫苗高表达成熟DCs表面标志物HLA-DR、CD80和CD83，具有很强的刺激淋巴细胞增殖的能力。4．皮内注射负载肿瘤抗原的DCs疫苗后，胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群(CD4~+/CD8~+)，NK细胞，外周血清IFN-γ、IL-4的水平明显提高，外周血PBMC在自体肿瘤抗原刺激下分泌IFN-γ、IL-4的能力明显增强。25例患者中有16例诱导出了针对自体肿瘤抗原的DTH反应。 结论：1．胃癌患者外周血DCs免疫功能明显下降，且随着患者TNM分期的发展而逐渐严重。外周血DCs免疫功能对预测胃癌预后有一定意义。2．胃癌细胞可在体外抑制DCs IL-12的产生及免疫表型的表达并诱导DCs发生凋亡。3．我们使用经外周血诱第三军医大学博士学位论文导培养及胃癌全抗原刺激的方法制备出了DCs疫苗，经DCs表面标志物HLA一DR、CD80和CD83检测及T淋巴细胞增殖刺激能力检测，提示制备的疫苗具有较强的生物活性。4.经皮下注射负载肿瘤抗原的DCs疫苗后，胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群，NK细胞活性及Thl型细胞因子明显提高，免疫能力明显增强，并诱导出了针对肿瘤抗原的T淋巴细胞反应。5.采用皮下注射，sx 100/dose，1次/周，治疗4次后，其免疫作用可维持8周左右时间。6.DCs疫苗治疗胃癌患者无明显的毒副作用。