CD73/腺苷信号对绒毛外滋养细胞功能的影响及其参与PE发病的机制研究

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目的:本课题将从代谢角度探讨CD73/腺苷信号对绒毛外滋养细胞功能的影响,及其在子痫前期(Preeclampsia,PE)发病中的可能作用。方法:首先,分析CD73在PE胎盘与正常胎盘中的表达差异。然后,使用氯化钴处理HTR8/SVneo细胞构建PE细胞模型,检测细胞中CD73在氧化应激状态下的表达。分别使用CD73抑制剂APCP或外源腺苷处理HTR8/SVneo细胞作为抑制组或加强组,通过气相色谱-质谱法分析细胞代谢组学变化;同时检测细胞线粒体氧化磷酸化水平、糖酵解水平、凋亡水平、增殖及迁移能力的变化;使用蛋白免疫印迹检测上皮间充质转化相关标记物的蛋白水平。结果:在组织实验中,与正常胎盘组织相比,PE胎盘组织中CD73蛋白表达显著增加(p<0.05)。在细胞实验中,CD73在氯化钴诱导的HTR8/SVneo细胞缺氧模型中显著上调(p<0.05);腺苷处理显著抑制HTR8/SVneo细胞的增殖能力和迁移能力(p<0.05),显著促进上皮间充质转化相关蛋白E-cadherin表达(p<0.05),CD73抑制剂APCP处理则有相反的结果。在代谢组学实验中,CD73/腺苷信号影响HTR8/SVneo细胞的能量代谢、核苷酸代谢、氨基酸代谢、碳水化合物代谢等14条代谢通路;腺苷组细胞内7种氨基酸浓度显著降低(p<0.05),腺苷组细胞外2种短链脂肪酸的摄取显著增加(p<0.05),APCP组细胞内和细胞外多种三羧酸循环中间产物浓度显著降低(p<0.05);腺苷处理显著抑制HTR8/SVneo细胞的氧化磷酸化水平和糖酵解水平(p<0.05),APCP处理则相反。结论:CD73/腺苷信号可能通过抑制绒毛外滋养细胞氧化磷酸化、糖酵解和氨基酸合成,并代偿性增加短链脂肪酸摄取,致绒毛外滋养细胞增殖、迁移功能受损,进而参与PE的发生发展。
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