【摘 要】
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银杏叶（Ginkgo biloba L.）为银杏树的干燥叶片,银杏叶中含有黄酮类、萜内酯类、有机酸类等活性成分。目前银杏叶按中国药典标准生产银杏叶提取物,即采用醇提取,柱层析工艺从银杏叶中提取黄酮、内酯类活性成分。在生产过程中醇提取时会将银杏叶中其他有机酸及蛋白成分都提取出来,并在柱层析流出液和水洗去杂液中弃去。本论文在从银杏叶生产废液中回收纯化高含量莽草酸大生产工艺的基础上,提取纯化奎宁酸产品,
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银杏叶（Ginkgo biloba L.）为银杏树的干燥叶片,银杏叶中含有黄酮类、萜内酯类、有机酸类等活性成分。目前银杏叶按中国药典标准生产银杏叶提取物,即采用醇提取,柱层析工艺从银杏叶中提取黄酮、内酯类活性成分。在生产过程中醇提取时会将银杏叶中其他有机酸及蛋白成分都提取出来,并在柱层析流出液和水洗去杂液中弃去。本论文在从银杏叶生产废液中回收纯化高含量莽草酸大生产工艺的基础上,提取纯化奎宁酸产品,为磷酸奥司他韦厂家提供新的合成原料来源。同时,分离纯化废液中银杏叶蛋白,将其进行回收利用作为蛋白饲料的添加原料,都将更大程度地将银杏叶资源进行综合利用,发挥出银杏叶药材最大经济效益。本论文围绕以上研究目标进行以下内容研究:1.HPLC测定方法建立及银杏叶原料来源优化研究新建HPLC-RID测定样品中奎宁酸含量方法,色谱条件为:Agilent C18柱（250x4.6 mm,5μm）;流动相:0.4%磷酸水:甲醇（99:1,v/v）;柱温:35℃;流速:0.80 m L/min;进样量:10μL;完成了9种不同树龄、6种不同采摘月份的银杏叶中奎宁酸、莽草酸的含量检测,筛选出同时提取这两种成分的银杏叶原料来源要求为树龄3～4年、4、5月份采摘的60℃烘干银杏叶。2.银杏叶中奎宁酸、莽草酸综合提取参数研究将银杏叶采用醇提方法,通过单因素结合正交试验,对数据进行综合分析处理,确定提取参数为:最优提取工艺为提取次数为2次,第一次提取2 h、第2次提取1 h,提取温度为70℃,料液比为1:8,乙醇浓度为70%。3.银杏叶提取物生产废液中奎宁酸、莽草酸分离纯化工艺研究以银杏叶提取物生产柱层析废液作为原料液,选用不同树脂进行静态吸附试验,确定大孔型D201树脂为层析树脂。其柱层析动态参数为:上样流速为1 BV·h-1,3 BV纯水除杂,5 BV 2%甲酸洗脱。纯化工艺确定为柱洗脱浓缩液活性炭脱色结晶,粗晶体按照1:20的固液比甲醇中溶解,过滤,溶液重结晶得98%莽草酸,滤渣加1:20甲醇溶解,过滤,取滤渣烘干即得93%奎宁酸。4.银杏叶提取物生产废液中奎宁酸提纯工艺中试调试银杏叶提取物生产废液中的奎宁酸的中试调试3批验证结果表明,每批银杏叶投料量为500kg,三批次平均产出奎宁酸21.86 kg,产率为4.37%;莽草酸35.72kg,产率为7.14%。三批次中试产品重复性好,奎宁酸平均含量达93.70%,莽草酸平均含量达98.36%,产品质量稳定。实现了银杏叶提取物生产废液的综合回收利用,产品综合成本低,具有很大的市场竞争力。5.银杏叶蛋白提纯工艺初探银杏叶中银杏叶蛋白的提取参数优化:根据正交实验结果得出最佳提取工艺参数为料液比为1:8,提取时间为2 h,提取温度为70℃;对银杏叶提取物生产废液中银杏叶蛋白的含量进行测定:浙江厂家为3.93%～5.09%,陕西厂家为8.34～14.10%;提纯最佳工艺为超滤结合醇沉,能将银杏叶蛋白含量从8.34%超滤富集到44.38%,再结合两次醇沉,将银杏叶蛋白纯度提高到63%左右。
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