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玉米赤霉烯酮(ZEA)是一种类雌激素霉菌毒素,主要危害哺乳动物的生殖系统,而猪是最敏感的动物。胚胎附植过程受到母体与胚胎严格的同步调控。雌激素是重要的调控因子,ZEA作为类雌激素进入机体扰乱机体内分泌平衡,同时作为真菌毒素侵害子宫内环境,从而影响胚胎附植成功率进而影响猪产仔率。关于ZEA对胚胎附植过程的影响及机制研究报道极少。本文主要以早期妊娠母猪为实验对象,探索ZEA对胚胎附植的影响及其分子调控机制。本研究分四组每组5头母猪,在妊娠第7-14天分别饲喂含ZEA浓度为0、1、2、10mg/kg日粮。第21天采样后完成了子宫内膜HE切片、电镜切片;在分离培养子宫内膜原代细胞的基础上,完成了ZEA处理的细胞凋亡、增殖、氧化应激、线粒体膜电位等流式细胞计数检测。实验通过Western Blot、mRFP-GFP-LC3双荧光检测体系等实验技术分别在组织和细胞上进行检测自噬标志基因LC3和P62及凋亡通路蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达。主要结果如下:1.HE染色结果显示子宫内膜炎症出血,血管通透性增加及子宫内膜上皮细胞层有增厚趋势。2.随着ZEA浓度的升高,电镜下自噬体、溶酶体明显增多,线粒体破损严重,说明ZEA导致子宫内膜组织发生自噬。3.原代细胞处理发现ZEA会导致细胞死亡、增殖率下降;凋亡结果显示:细胞凋亡数随着ZEA浓度增加而增加;线粒体膜电位流失及氧化应激变化不明显。4.Western Blot结果发现:高浓度组ZEA导致子宫内膜组织Bcl-2/Bax蛋白表达水平降低;LC-3 II和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高,但P62没有伴随LC-3II的升高而降低,证实ZEA导致细胞发生凋亡,并且激活自噬,但自噬流并不通畅。5.通过mRFP-GFP-LC3双荧光实验得到ZEA导致细胞发生自噬,但自噬流被抑制,进一步证实了ZEA激活自噬同时抑制自噬流的结论。6.最终结论:ZEA在母猪胚胎附植过程中,通过子宫内膜细胞的自噬损伤途径和线粒体Caspase-3凋亡通路破坏子宫胚胎附植内环境的平衡,引起组织出血炎症,不利于胚胎附植。