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昼夜节律影响动物多种生理过程,包括心血管系统功能、能量代谢、免疫、细胞再生和激素分泌。从生物节律变化角度,研究激素配体-受体和生物钟调控鸡子宫部前列腺素F受体基因(PTGFR)表达变化规律的成因,分析时钟基因和前列腺激素(PGF2α)对激素受体基因表达的影响,阐述时钟基因和PTGFR基因之间的潜在调控关系,具有重要科学意义。本研究以罗曼蛋鸡为材料,选择育成期和产蛋高峰时期鸡只,分析不同生理状态下子宫组织形态学变化规律。检测血液中前列腺素(PGs)、雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)和黄体生成素(LH)含量的动态变化和激素受体基因以及时钟基因表达量的变化规律。体外培养原代子宫上皮细胞,经免疫组化鉴定后为上皮细胞,测定细胞生长曲线;进行不同浓度梯度的激素处理,CCK8检测激素对子宫上皮细胞体外增殖的影响;并用siRNA干扰上皮细胞中核心时钟基因Bmal1,实时荧光定量检测时钟基因Bmal1和Per2、时控基因Rev-erb以及PGF2α激素受体基因PTGFR的表达水平,同时探索PGF2α对时钟基因表达的影响,结果如下:(1)罗曼蛋鸡产蛋时间集中在早上8:0010:00,血液中生殖激素在不同时期呈规律性变化,产蛋高峰时期的含量总体上高于育成期,子宫组织激素受体基因mRNA表达量变化与血液相应激素变化大体一致;育成期除LH激素外,其余3种激素在一天中波动不大。产蛋高峰时期PGs产蛋前的含量显著高于产蛋后,PTGFR表达量在产蛋前后4 h均显著升高(P<0.05);FSH和E2在产蛋后(18:00)出现极显著上升(P<0.01)。(2)组织切片HE染色结果显示,产蛋期子宫部形态学变化主要表现为:ZT8(14:00)时内膜厚度增高和ZT4(10:00)时肌层厚度降低,ZT16ZT20(22:0002:00)时子宫壁增厚,浆膜厚度则变化不大。(3)成功培养了鸡子宫上皮细胞,并测定了PGF2α和E2激素对细胞增殖的影响。其中50 nM的PGF2α和10 nM的E2显著促进了子宫上皮细胞体外增殖(P<0.05),但两种激素进行联合处理对细胞体外增殖效果不明显(P>0.05)。与对照组相比,100 nM PGF2α处理后Bmal1表达量在024 h显著下降(P<0.05),Per2的表达量反之,且Per2的振幅显著增加,PTGFR的表达量显著下降(P<0.05)或不变(P>0.05);PGF2α处理2448 h时,Bmal1和Per2的表达量无明显变化(P>0.05),而PTGFR的表达量呈显著上升(P<0.05)或不变(P>0.05);PGF2α处理024 h,PTGFR蛋白表达升高,并呈节律性。(4)通过血清休克处理,成功建立了子宫上皮细胞体外节律模型,并探究了时钟基因对PTGFR基因表达规律的影响。血清休克使时钟基因和PTGFR呈规律性表达,干扰时钟基因Bmal1后PTGFR表达量下降(P<0.05),表明时钟基因可以调控PTGFR的表达。综上所述,时钟基因可以调控PTGFR的表达,PGF2α亦可以调控PTGFR和时钟基因的表达,PTGFR的表达变化规律受到二者调控。