目的: 建立环介导等温扩增技术（LAMP）和斑点金免疫渗滤技术（DIGFA）测定患者标本中沙门菌invA基因和全菌细胞抗原的方法，应用于早期快速诊断肠热症。 方法: 1．在一定条件下用胶体金标记纯化后的抗体，制备金标探针。 2．先将硝酸纤维素膜用PBS处理，之后用纯化的沙门菌全菌抗体进行包被，待包被过的硝酸纤维素膜经封闭液处理后制成沙门菌抗原的检测装置，并对检测条件进行优化。 3．收集急性发热患者就诊当天的血清或血浆（所有标本为与血培养标本同时采集的）标本，且最后经培养证实为沙门菌感染；其他细菌感染、自身免疫疾病患者和肝炎病人以及健康体检人员血清或血浆作为阴性对照。同时用DIGFA和肥达反应检测。 4．对LAMP和DIGFA方法进行反应条件优化，并分别对标准菌株进行检测，验证两种方法的特异性。 5．用LAMP直接从血培养瓶和粪便标本中检测沙门菌特异invA基因、PCR直接从血培养瓶和粪便标本中检测沙门菌特异fimA基因，用培养方法结果对基因扩增的LAMP方法检出率进行评价；查看LAMP法阳性结果与最后的培养结果和DIGFA结果是否一致。 6．收集上述经初次DIGFA检测结果为阴性患者2～3后的血清或血浆标本，继续用DIGFA检测。 7．收集未做血培养或血培养阴性，临床症状典型，而患者前后两次肥达反应检测结果由阴性变为阳性或有4倍滴度以上升高临床诊断疑似沙门菌感染患者的血清或血浆标本。 8．将血液标本中的抗原检测以及粪便标本中的特异基因检测结果与培养方法结果相比较，验证快速诊断肠热症的合理性。 结果: 1．经过培养方法确诊的14例沙门菌感染患者急性发热期血清或血浆标本，在DIGFA首次检测中共有7例阳性，检出率为50％，检测过程5～10min内即可完成；而同期肥达反应有5例阳性，检出率为35．7％，需要24h。而2～3日后7例阴性患者的新标本再次检测中新增3例肥大反应阳性，而在这之中有2例DIGFA法阳性。 2．其他细菌感染20例、自身免疫疾病患者和肝炎病人各20例以及健康体检人员30例血清或血浆标本经DIGFA检测均没有发现阳性，特异性100％。而肥达反应出现了几例阳性标本。 3．对于91份血培养阳性报警瓶和30份粪便培养标本，用常规培养方法分别检测到了18株和3株沙门菌；用LAMP检测invA基因和普通PCR方法检测fimA基因均分别检测到了18例和5例阳性标本，且传统方法和分子生物学方法阳性检测结果相符；以培养方法为金标准，两种基因扩增方法灵敏度和特异度均达到了100％。LAMP方法最低检测限达到了102 cfu/mL，三种方法检出率经统计为X2=0．146，P=0．929>0．1。 4．对于5例未做培养或培养阴性，且前后两次肥达反应由阴性变为阳性或4倍滴度升高的临床诊断疑似沙门菌感染患者，经DIGFA检测，共有3例阳性。 5．DIGFA和LAMP检测为阳性结果的标本，通过金标准培养方法验证，这些标本均为沙门菌感染，而且DIGFA为阳性的标本结果也同LAMP一致。 结论: 1．DIGFA快速检测出临床血清或血浆标本中的沙门菌抗原组分，对早期诊断肠热症有很高临床价值，其检测时间10min内即可完成，明显短于检测抗体肥达反应的24h，培养方法的48～72h。而且简单、特异，无需相关技术人员和特殊设备。 2．LAMP和普通PCR有很高的灵敏度和特异度，LAMP检测沙门菌时间在1h内，普通水浴即可完成，且最低检测限可以达到102 cfu/mL菌液浓度。所需时间也大大短于培养方法的48～72h。 3．DIGFA方法具有反应时间短、操作简便、结果易于判定等优点；LAMP无需特定基因扩增仪器设备，在恒温水浴中1h即可完成对特异基因的扩增。两者阳性结果相吻合，可以排除假阳性和假阴性因素。 4．LAMP和PCR方法各检测一种基因，可以起到互相验证作用，避免假阳性的发生。 5．通过对血液和粪便标本中的沙门菌抗原和基因测定，发现结合这两种或单独使用某项指标可以快速、准确的诊断肠热症。