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目的本研究通过苏木4种提取物(乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物)对两种致龋菌变形链球菌、粘性放线菌的抑菌和杀菌,对致龋菌抑制生长、产酸、黏附、产糖的影响,对牛切牙牙釉质脱矿及再矿化作用的研究,并与阳性对照组进行统计学比较,为苏木4种提取物防龋的临床应用提供理论和实验依据。方法1.用二倍稀释法测苏木4种提取物对变形链球菌和粘性放线菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。2.选取最低抑菌浓度(MIC)以下的4个药物浓度梯度,用p H酸度计测苏木4种提取物对变形链球菌和粘性放线菌产酸的影响。3.选取最低抑菌浓度(MIC)以下的4个药物浓度梯度,用酶标仪测苏木4种提取物对变形链球菌和粘性放线菌黏附的影响。4.选取最低抑菌浓度(MIC)以下的4个药物浓度梯度,用蒽酮法测苏木4种提取物对变形链球菌和粘性放线菌产水溶性多糖和水不溶性多糖的影响。5.选取最低抑菌浓度,用显微维氏硬度计测苏木4种提取物对牛切牙牙釉质硬度的影响。6.选取最低抑菌浓度,用偏光显微镜观察苏木4种提取物对牛切牙牙釉质再矿化后龋损程度的影响。7.选取最低抑菌浓度,用扫描电镜观察苏木4种提取物对牛切牙牙釉质再矿化后釉质微表面的影响。8.选取最低抑菌浓度,用激光共聚焦显微镜测苏木4种提取物对牛切牙牙釉质再矿化后龋损程度和荧光量的影响。结果1.MIC和MBC:苏木各提取物对变形链球菌MIC均为2.5 mg/mL,MBC均为5mg/mL。苏木的乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、水提取物对粘性放线菌的MIC值分别为2.5 mg/mL、2.5 mg/mL、1.25 mg/mL、1.25 mg/mL。苏木各提取物对粘性放线菌MBC均为5 mg/mL。2.产酸实验:苏木各提取物对变形链球菌和粘性放线菌都有抑制产酸效果,抑制效果随浓度增大而增大。其中苏木1/2 MIC乙醇提取物对粘性放线菌的抑制产酸效果最好,与阳性对照组没有统计学差异(P>0.05)。1/2 MIC水提取物对变形链球菌的抑制产酸效果最好,与阳性对照组没有统计学差异(P>0.05)。各组对粘性放线菌、变形链球菌的抑制产酸效果随着药物浓度递增而增强,药物浓度与抑制产酸效果呈正相关。3.黏附实验:苏木各提取物对变形链球菌和粘性放线菌都有抑制黏附作用,其中,苏木1/2 MIC乙醇提取物无论是对粘性放线菌还是变形链球菌抑制黏附的效果都最好,而且苏木各提取物对变形链球菌更为敏感,抑制黏附效果比粘性放线菌好。苏木各提取物对变形链球菌和粘性放线菌的黏附抑制率随着苏木各提取物浓度的增大而增大,苏木各提取物浓度与抑制黏附效果呈正相关。4.产糖实验:苏木各提取物对变形链球菌和粘性放线菌都有抑制产糖作用,抑制效果随浓度增大而增大,苏木各提取物浓度与抑制产糖效果呈正相关。其中苏木1/2 MIC水提取物对变形链球菌产水溶性多糖和水不溶性多糖抑制效果最好;苏木1/2 MIC乙醇提取物对粘性放线菌产水溶性多糖抑制效果最好,1/2 MIC正丁醇提取物和1/2 MIC乙醇提取物对粘性放线菌产水不溶性多糖抑制效果最好。5.硬度测定实验:苏木各提取物对牛切牙牙釉质再矿化前后硬度变化值都有差异(P<0.05),苏木水提取物对牛牙釉质硬度恢复效果最好,硬度恢复率达到66.9%,其次是乙醇组,硬度恢复率58.2%。6.偏光显微镜观察:经苏木各提取物处理后,人工龋损的深度明显变浅,其中阳性对照组、苏木乙醇提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物实验组均出现负性双折射的再矿化带。7.扫描电镜观察:正常组牙体表面平整光滑无异物,脱矿后釉质表面出现凹坑,釉质被溶解,表面呈现鳞片状结构。釉质龋再矿化后,阳性对照组可见釉质表面有矿物质沉积,而且釉质表面相对光滑。苏木乙醇组牙体表面有矿物质沉积并连接成片,凹陷变浅;乙酸乙酯组表面趋于平整凹陷变浅;正丁醇组和水组不同程度颗粒状沉积物且凹陷变浅。8.激光共聚焦显微镜分析:苏木乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物与阴性对照组的总荧光量相比,有统计学差异(P<0.05),且正丁醇提取物和水提取物的总荧光量和阳性组没有统计学的意义(P>0.05);苏木正丁醇提取物、水提取物和阴性对照组的平均荧光量相比,有统计学差异(P<0.05),且苏木乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物的平均荧光量和阳性组没有统计学差异(P>0.05)。结论本实验从抑制常见致龋菌和生物矿化两方面研究了苏木的防龋作用。苏木的4种提取物对变形链球菌和粘性放线菌都有抑菌杀菌效果,其中正丁醇和水提取物抑菌效果优于乙醇和乙酸乙酯提取物;苏木各提取物对变形链球菌和粘性放线菌都有抑制产酸、黏附、产糖的效果;苏木各提取物有提高牙釉质表面硬度的作用,其中水提取物效果最好,效果略差于阳性组;偏光显微镜观察发现苏木各提取物有促进牙釉质再矿化的能力,各实验组均出现了负性双折射的再矿化带,其中正丁醇和水提取物组的效果更好;扫描电镜观察各实验组牙釉质表面出现不同程度的沉积物,乙醇提取物在牙齿表面形成片状晶体,其他提取物是形成颗粒状晶体,均具有再矿化作用;激光共聚焦显微镜可以观察到各实验组龋损总荧光量和平均荧光量均低于阴性组,且正丁醇提取物和水提取物和阳性组没有统计学差异(P>0.05),进一步说明苏木提取物有再矿化效果,可以阻止龋损的进程。