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腺相关病毒8(adeno-associate.viru.8，AAV8)是2002年在猿猴中分离得到的一类新型腺相关病毒载体，相对常用的AAV2具有更高的感染效率，更稳定持久的表达时间，且免疫原性更低，感染后表达迅速。2004年Blood报道AAV8在动物实验中已被成功用于血友病A的基因治疗。2007年，阐明了AAV8的晶体结构。目前AAV8的研究受到了各国科学家的重视，应用AAV8来治疗各种恶性肿瘤也成了基因治疗领域研究的一个新热点。然而，目前对于AAV8的研究还不成熟，AAV8的制备相对AAV2要繁琐和困难，只是在几家国外实验室做得比较出色，在国内做的也很不成熟，因而大大限制了AAV8的推广和利用。我们想通过这个课题来研究并建立相对较好的重组腺相关病毒2/8(recombinantadeno-associate.viru.2/8，rAAV2/8)的制备系统。
另外，骨髓间充质干细胞(bon.marrow-mesenchyma.ste.cell，MSC)，是存在于骨髓中的非造血性干细胞，近年来的体内外实验表明MSC能高度靶向迁移到肿瘤组织，而且在临床上MSC已成功应用于造血移植，具有较好的安全性，因而MSC在肿瘤的靶向性细胞治疗的应用上引起了广泛的关注，成为非常有前景的一类干细胞治疗载体。2008年的Ste.cells和Gen.therapy上分别报道了利用MSC治疗肺转移性的黑素瘤和前列腺癌。为此，我们做了MSC对卵巢癌体内趋化作用的实验，想在下一步实验中联合rAAV2/8和MSC来做靶向基因治疗的研究。
以此为理论基础，我们构建并鉴定了包装rAAV2/8的三质粒pSH3-D(辅助质粒)、p5E18-VD286(包装质粒)和AAV-neo-eGFP(载体质粒)，稳定和优化了三质粒共转染的聚乙烯亚胺(PEI)沉淀法，在HEK293细胞系中成功重组包装出了携带有eGFP基因的rAAV2/8，建立了较为稳定的rAAV2/8病毒的制备系统。在MSC趋化卵巢癌的实验中，我们首先用10只Balb/c裸鼠注射人SKOV3ip卵巢癌细胞，经动物解剖和HE染色观察，5只成腹腔瘤，5只成肺转移瘤，建成了卵巢癌模型；在此基础上，从转基因(eGFP)的小鼠骨髓中分离得到MSC，研究了MSC在荷瘤裸鼠体内对卵巢癌的靶向转移性，免疫组化表明MSC可转移到卵巢癌.因此，我们建成了rAAV2/8的制备系统，并证明了MSC体内对卵巢癌的趋化性，为rAAV2/8的基因治疗研究，以及最终为联合MSC和rAAV2/8来治疗卵巢癌和其他恶性肿瘤奠定了基础。