新型微生物粘多糖的制备与性能检测

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粘多糖在各种各样的微生物多糖中被认为是一类最具有发展前景的活性多聚糖。粘多糖是由糖醛酸和氨基己糖交替连接组成的大分子多聚糖,有时还含有硫键。由于粘多糖独特的理化性质及生物活性,粘多糖被广泛应用于美容、石油、医疗等领域。本文从刚宰杀牛的牛鼻中刮取鼻粘膜,筛选诱变获得一株高产新型粘多糖的兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus) BU100,并将这种新型粘多糖命名为粘多糖A。对粘多糖A发酵条件的优化,粘多糖A的分离与结构鉴定,粘多糖A的性能检测等进行研究。论文在已有研究基础上,进一步的对发酵参数进行了优化,确定了最佳的发酵条件。5L发酵罐发酵,粘多糖A的产量可达13.48 g·L-1。尝试使用絮凝剂、高速离心以及硅藻土板框过滤等方法分离提纯粘多糖,分别考察分离过程中菌体的去除率,蛋白的去除率和多糖的损失率等,优化的分离方法为絮凝剂-硅藻土板框过滤法,此方法的粘多糖A损失率为24.15%(m/m),滤过液OD600值为0.002,产品蛋白含量为0.07%(m/m),符合标准(<0.1%)。运用红外光谱分析,核磁共振光谱分析,圆二色扫描,刚果红实验等仪器分析手段对粘多糖A含有的官能团以及组成单元的连接键进行了分析,使用咔唑对粘多糖A进行检测。检测结果粘多糖A中糖醛酸和氨基糖的摩尔比例接近1:1,粘多糖A为全部由1-4糖苷键连接的葡糖醛酸和氨基葡糖的多聚糖。论文对粘多糖A的保湿性能、吸湿性能、抗氧化性能、耐透明质酸酶性能、耐溶菌酶性能、清除亚硝酸盐的性能以及内毒素含量等进行了检测。结果表明粘多糖A具有大分子多糖所具有的保湿、吸湿性,可被用于化妆品等领域,粘多糖还具有抗氧化性,防止机体衰老,其保湿性,总体的抗氧化性能相对较好,同时粘多糖A不被透明质酸酶和溶菌酶分解,糖溶液粘度大,润滑性好。粘多糖A的内毒素含量<0.5 Eu/mg,符合标准,可被更加有效、安全地应用于医药领域。
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