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目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病模型大鼠肝细胞内PI3K p85a蛋白表达的影响,探讨其治疗NAFLD的作用机制。方法:雄性SD大鼠76只,随机分为正常组、模型组、疏肝组、健脾组、综合组(疏肝方加健脾方)、三七组和自然恢复组,每组10只。正常组给予基础饲料,其余组均给予高脂饮食(基础饲料83%,10%猪油,5%蔗糖,1.5%胆固醇,0.5%胆盐)。12周后,疏肝组给予柴胡疏肝散灌胃,健脾组给予参苓白术散灌胃,综合组给予柴胡疏肝散加参苓白术散灌胃,三七组给予三七脂肝丸灌胃,正常组、模型组和自然恢复组均给予蒸馏水灌胃,同时除模型组继续给予高脂饮食外,其余均给予基础饲料喂养。第20周处死全部大鼠,用稳态模型(HOMA)法评价胰岛素抵抗程度,采用铜离子结合氯仿提取法测定血清游离脂肪酸(FFA),全自动生化仪检测血清TG、TC、ALT、AST、LDL-C、HDL-C、GLU、ApoB100,放射免疫法测定血清胰岛素;光镜下观察肝脏的脂肪变性、炎症程度;应用免疫组化方法检测各组大鼠肝细胞内PI3K p85a蛋白的表达。结果:1.与正常组相比,模型组大鼠血清TG、TC、ALT、AST、LDL-C、FFA、GLU、ApoB100升高(P＜0.01或P＜0.05),HDL-C显著下降(P＜0.01),胰岛素抵抗指数显著升高(P＜0.01);组织学显示模型组大鼠肝细胞均呈现弥漫性脂肪变性、小叶内炎症细胞浸润。2.正常组大鼠肝细胞PI3K p85a表达很少,模型组大鼠肝细胞PI3K p85a表达显著增多(P＜0.01)。3.与模型组相比,疏肝组、健脾组、综合组、三七组及自然恢复组均可以改善肝功、血脂、胰岛素抵抗(P＜0.05),减轻肝组织脂肪变及炎细胞浸润,减少肝细胞内PI3K p85a蛋白的表达(P＜0.05);与自然恢复组相比,疏肝组、健脾组及综合组大鼠肝功、血脂、血糖的改善无明显差异(P＞0.05),但其可明显减轻肝细胞脂肪变,改善胰岛素抵抗及降低肝细胞内PI3K p85a蛋白的表达,相比差异有统计学意义(P＜0.05)。结论:1.采用高脂饮食可成功复制大鼠非酒精性脂肪性肝病胰岛素抵抗模型。2.高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞内的PI3K p85a蛋白表达增多,且其蛋白的表达分布与肝细胞的脂肪变性有相关性;PI3K p85a表达增多导致PI3K蛋白的活性下降,信号无法向下游正常传导,这可能是高脂饮食引起肝细胞胰岛素抵抗进而致使全身脂质代谢紊乱,脂肪在肝细胞聚集的原因。3.肝郁脾虚是非酒精性脂肪性肝病的主要病机,痰浊瘀血是其发展的重要病理因素,胰岛素抵抗的产生与肝郁、脾虚及痰浊密切相关,因此,可通过运用疏肝健脾法及其方药改善胰岛素抵抗进而达到治疗非酒精性脂肪性肝病的目的。4.非酒精性脂肪性肝病的早期,可以通过单纯的控制高脂饮食的方法改善肝功、血脂及血糖,但是控制高脂饮食联合疏肝、健脾方药能显著改善胰岛素抵抗及肝组织病理;疏肝、健脾方药能降低肝细胞PI3K p85a蛋白的表达,这可能是其改善胰岛素抵抗,治疗NAFLD的作用机制之一。