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一、目的和意义近年来随着我国对海洋开发的不断深入,随着社会发展,海洋活动日益频繁,海事人员在受到各种外伤后伤口容易受到海水污染,会对全身造成影响,还有可能影响伤口的修复。由于受伤环境限制,患者很难得到较为及时、正确的救治。烧伤合并海水浸泡对伤情的影响也越来越受国内外学者关注,但迄今为止有关海水浸泡对浅二度烧伤患者的伤情影响及其处理措施的研究鲜有报道。本研究以5%TBSA浅Ⅱ度烫伤大鼠作为模型,分别从创面组织病理损害特点、创面组织及血清TNF-α、SOD、MDA含量变化等几方面探讨海水浸泡对浅二度烫伤大鼠的伤情影响及可能的作用机制,并探讨相关局部治疗,为海上烧、创伤救治提供理论参考依据。二、材料和方法1、实验分组:SPF级Wistar大鼠70只,体重为180～220g,雄性,随机分为健康对照组(n=7)、单纯烫伤组(n=21)、烫伤+淡水浸泡组(n=21)、烫伤+海水浸泡组(n=21);2、致伤方法:实验时0.3%戊巴比妥钠(lml/100g)腹腔注射将大鼠麻醉后,使用电动剃毛机去除大鼠背部体毛;除健康对照组组外,将其余各组动物四肢固定,将已脱毛区域置于70℃恒温水浴中12s,造成实验动物5%TBSA浅Ⅱ度烫伤(已经病理证实),致伤后再将淡水及海水浸泡组动物背部创面皮肤浸泡于海水中,浸泡时间分别为2h、4h和6h。3、检测指标及方法:浸泡后2、4、6h切取创面组织做电子显微镜及光学显微镜镜病理学观察;取材的同时于眶静脉丛采血待测,血液行肝素抗凝处理后,立刻提取血清;切取创面皮肤组织样本,进行组织匀浆处理,提取上清液;用ELISA法测定TNF-α含量,用TBA法测定MDA含量;用羟胺法测定SOD含量;4、数据处理:数据以均数±标准差表示(X±s),采用SPSS19.0统计软件析因方差分析、单因素方差分析及LSD、Tamhane、Welch、Brown-Forsythe(B)检验比较各组内差异(软件自动略去该统计量值),P<0.05为显著性差异。三、结果1、创面组织病理形态学观察:健康对照组镜下表皮细胞排列整齐、连续。上皮细胞着色良好。真皮层组织及附属结构清晰完整,真皮胶原排列整齐。单纯烫伤组镜下可见表皮层次尚清楚,细胞出现肿胀,层次结构尚清楚,细胞核结构不清。表皮内有水疱形成,真皮出现水肿、间质疏松,血管扩张充血,符合浅二度烫伤病理表现。淡水浸泡组、海水浸泡组动物创面表皮层次减少,部分表皮细胞核结构不清,并有大量炎性细胞浸润,真皮附件水肿,微血管扩张充血,且随着浸泡时间增长而加重。2、电子显微镜下创面形态学改变:正常对照组镜下角质层排列整齐、连续,真皮毛细血管基膜完整,腔内绒毛、内皮细胞边缘清晰,形态饱满,内皮细胞间的连接以及细胞结构清晰可见;单纯烫伤组镜下角质层排列紊乱,细胞边界不清,真皮毛细血管基膜基本完整,腔内有红细胞堆积,内皮细胞肿胀,间隙增大,胞质松散;淡水浸泡组镜下角质层排列较规整,毛细血管基膜可见,血管腔中可见红细胞堆积,内皮细胞肿胀,细胞器未见明显异常;海水浸泡组镜下可见,角质层排列杂乱无章,核固缩,部分细胞器消失,毛细血管基膜消失,可见红细胞外溢,内皮细胞肿胀、胞质松散,胞浆内出现空泡样物,失去完整细胞结构,部分细胞皱缩,部分细胞已有脱落,形成空洞;3、创面TNF-α,SOD,丙二醛含量:与健康对照组(63±25)pg/ml比较,单纯烫伤组、烫伤+海水浸泡组大鼠创面组织TNF-α含量在伤后2、4、6 h分别为(496±89,263±39,108±19)(1373±15,1742±12,2136±44)pg/mg,明显增高(P<0.05或P<0.01);烫伤+淡水浸泡组大鼠创面组织TNF-α含量在伤后2h为(276±46)pg/mg明显增高(P<0.01),在伤后4、6h无明显变化(P值均大于0.05)。与健康对照组(46±6)U/mg比较,单纯烫伤组、烫伤+淡水浸泡组大鼠创面组织 SOD 含量在伤后 2、4、6h 分别为(304±27,259±31,152±14)(258±22,215±15,78±19)U/mg均增高(P<0.05或P<0.01);烫伤+海水浸泡组大鼠创面组织SOD含量在伤后2、4 h分别为(279±28,176±10)U/mg均增高(P值均小于0.01),在伤后6h无明显变化(P值大于0.05)。单纯烫伤组、烫伤+淡水浸泡、烫伤+海水浸泡组大鼠创面组织丙二醛含量在伤后 2、4、6h 分别为(10.9±1.2,14.1±1.5,31.4±2.4)(15.1±1.6,23.9±1.7,41.7±5.4)(19.5±2.3,28.2±3.2,48.±6.9)nmol/mg,明显高于健康对照组(6.3±0.8)nmol/mg(P值均小于0.01)。4、血清TNF-α,SOD,丙二醛含量:与健康对照组(247±27)pg/ml比较,单纯烫伤组大鼠血清TNF-α含量在伤后2、4 h分别为(675±122,367±54)pg/ml明显增高(P<0.05或P<0.01),在伤后6 h为(147±27)pg/ml明显下降(P<0.01);烫伤+淡水浸泡组大鼠血清TNF-α含量在伤后2、4h无明显变化(P值均大于0.05),在伤后6 h为(90±24)pg/ml明显下降(P<0.01);烫伤+海水浸泡组大鼠血清TNF-α含量在伤后2、4、6 h分别为(1 646±58,2 086±114,2 951±58)pg/ml明显增高(P值均小于0.01)。与健康对照组(364±123)U/ml比较,单纯烫伤组大鼠血清SOD含量在伤后2、4h分别为(489±13,447±14)U/ml明显增高(P值均小于0.05),在伤后6h无明显变化(P>0.05);烫伤+淡水浸泡组大鼠血清SOD含量伤后2、4h无明显变化(P值均大于0.05),在伤后6h为(282±13)U/ml明显降低(P<0.05);烫伤+海水浸泡组大鼠血清SOD含量在伤后2h(461±23)U/ml明显增高(P<0.05),在伤后4、6 h(226±8,205±10)U/ml明显下降(P值均小于0.01)。与健康对照组(5.4±1.5)nmol/mL比较,单纯烫伤组、烫伤+淡水浸泡组、烫伤+海水浸泡组大鼠血清丙二醛含量在伤后2、4、6 h(14.2±1.2,18.2±1.1,39.1±2.7)(18.8±1.2,29.9±1.1,52.6±3.9)(19.1±1.5,35±3.3,55.4±9.8)nmol/mL均明显增高(P值均小于0.01)。四、结论1、海水浸泡会加重浅二度烫伤创面炎症反应,从而加深创面损伤。其机制可能为海水高渗、碱性状态直接导致机体组织细胞脱水、变性坏死,还有海水低温强散热的特点,会导致机体体温的急剧下降而引起血流动力学紊乱,从而加深创面损伤程度,使更多的间生态组织转变为坏死组织,而坏死组织的增多则会加剧炎症因子的分泌,进一步加剧机体全身及创面组织损伤。2、海水浸泡会加重浅二度烫伤创面炎症反应创面的氧自由基损伤。其机制可能为海水低温强散热的特点直接导致机体微循环障碍,加重能量代谢紊乱,氧自由基生成增加,过氧化脂质反应增强。3、大鼠烫伤后合并海水浸泡其炎症反应及氧自由基损伤加重程度与海水浸泡时间明显相关,随浸泡时间延长损伤程度越大,表明海水浸泡对机体伤情有负面影响。