低强度超声对大鼠早孕药物流产后子宫复旧的影响及其机制的初步研究

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目的1.观察低强度超声对早孕药流子宫的收缩作用,分析其对子宫复旧的影响。2.探讨低强度超声促进早孕大鼠药物流产后子宫复旧的可能机制,为低强度超声促进产后子宫复旧提供理论依据。1方法1.随机选择3月龄以内的雌性普通级远交群大鼠(SpragueDawley,SD)55只,雄性普通级SD大鼠5只,按照雌雄2:1的比例夜晚(20:00)合笼,12小时后(次日8:00)观察阴道栓,然后进行阴道涂片于显微镜下观察精子。以显微镜发现精子或明确查见阴道栓的当天为妊娠第1天。若未发现,雌雄大鼠分笼喂养7天后,按前法再次合笼至妊娠,妊娠第7天,依次灌胃米非司酮16.6mg/kg(8:00)与米索前列醇0.1mg/kg(18:00),建立30只大鼠早孕药物完全流产模型。2.将建模成功的30只大鼠采用完全随机分组法分组到超声辐照组和假辐照组各15只,超声辐照组:药流后第一天开始,使用超声波子宫复旧仪照射子宫覆盖区域(声强=2W/cm2,频率=0.8MHz)。每日1次,每次30分钟,连续5天;假辐照组:从药流后第一天开始使用超声波子宫复旧仪照射子宫覆盖区域(声强=0W/cm2,频率=0MHz)。每日1次,每次30分钟,连续5天。3.孕囊排出后,用眼科镊于大鼠阴道内置入定量棉球一个,每2~6小时取出血棉,检测其出血量,并记录出血时间。4.治疗完成后次日,取大鼠左侧子宫组织黄豆大小3块,采用酶联免疫吸附法(ELISA)、化学检测法、免疫组织化学法(IHC)分别检测内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、一氧化氮(nitrogen monoxide,NO)和缩宫素受体(oxytocin receptor,OTR)。结果1.受孕成功率为41.7%(40/96)。三种检查方法,灵敏度阴栓+精子检查(0.9000)最高,与精子检查(0.8750)相差不大,阴栓检查灵敏度(0.7000)最低,特异度三种方法相差不大;阴栓检查假阴性率高达30.00%,与精子检查(12.50%)和联合检查相比(10.00%)差异均有统计学意义(*P<0.05),三种检测受孕方法比较假阳性率无显著性差异(P>0.05)。药物流产成功率为88.24%(30/34)。2.肉眼观:假辐照组,子宫已不见孕囊窝,但较正常大鼠子宫粗约2mm~3mm,表面充血明显,呈樱红色;超声辐照组,大鼠子宫大体观已基本恢复至未孕状态。病理:超声辐照组,子宫肌纤维细长,排列规则,内环外纵;假辐照组,子宫肌纤维轻度增生肥大,排列稍紊乱,子宫肌层整体较超声辐照组厚,子宫腔较大。3.阴道出血量、出血时间的比较,超声辐照组的大鼠阴道出血量明显少于假辐照组,差异有统计学意义(*P<0.05);但阴道出血时间超声辐照组和假辐照组之间没有显著性差异(P>0.05)4.超声辐照组的大鼠子宫组织匀浆中ET-1的含量明显高于假辐照组,具有显著的统计学意义(*P<0.05),而超声辐照组大鼠子宫匀浆中NO的含量较低,但没有明显的统计学意义(P>0.05)。5.超声辐照组OTR表达多为强阳性,假辐照组OTR表达多数为弱阳性;无论子宫肌层还是内膜层超声辐照组强阳性表达率均高于假辐照组,且差异均有显著统计学意义(*P<0.05)。结论1.精子检查法操作简便,方法易于掌握,灵敏度高,为最佳的判断大鼠雌鼠受孕的方法;米非司酮16.6mg/kg+米索前列醇0.1mg/kg剂量组建立完全药流模型成功率高,可有效的运用于大鼠完全流产模型的建立。2.声强=2W/cm2,频率=0.8MHz的低强度超声作用于大鼠完全流产子宫,可促进早孕大鼠流产后的子宫复旧。3.增加子宫组织ET-1的含量,对ET-1和NO平衡的调节可能是低强度超声促进子宫收缩的重要途径之一。4.低强度超声促进子宫平滑肌收缩的机制与增加子宫肌和内膜细胞的OTR表达有关。
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