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近年来,由于抗真菌药物在临床治疗中的不合理使用,真菌耐药性不断增强,常用的抗真菌药物已不能达到治疗真菌感染的效果,研究新型抗真菌药物和治疗方法是解决这一问题的重要途径。传统中药厚朴的活性成分之一和厚朴酚具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抑制血小板凝集等作用,非常具有科学研究价值和临床应用意义。本研究利用临床实验室标准化委员会规定的微量稀释法药敏实验,分别测定了中药活性成分和厚朴酚与临床常用抗真菌药物氟康唑联合使用时对22株临床耐氟康唑白色念珠菌、两株多药外输泵过表达临床分离白色念珠菌:C. albicans TW 00313(过表达CDR1和CDR2),C. albicans TW 07239(过表达MDR1和ERG11)和三株质控菌株C. albicans ATCC 10231、C. parapsilosis ATCC 90018、C. krusei ATCC 6258的最低抑菌浓度,评价和厚朴酚抗白色念珠菌活性;利用棋盘式微量稀释实验测定和厚朴酚与氟康唑联合抗白色念珠菌的分级抑菌浓度指数,评价和厚朴酚与氟康唑联合使用的体外抗真菌协同作用效果;利用药物的时间-杀菌曲线实验研究和厚朴酚与氟康唑联合使用时,在特定时间内对临床耐药白色念珠菌的杀菌作用效果,进一步确定和厚朴与氟康唑联合使用的体外抗真菌的协同作用。之后,采用尾静脉注射白色念珠菌的方法建立系统播散性白色念珠菌病小鼠模型,通过研究给予不同药物治疗后小鼠的存活率和小鼠肾脏负荷的白色念珠菌量,进一步评价和厚朴酚与氟康唑的协同抗临床耐药白色念珠菌的协同作用。结果表明,和厚朴酚在体外对白色念珠菌具有较好的抗真菌活性,当和厚朴酚与氟康唑联合应用于体外抗白色念珠菌病实验时,和厚朴酚与氟康唑对白色念珠菌的最低抑菌活性均有所降低,其中,氟康唑降低的效果最为明显,与单独使用时相比,大约降低了64-512倍;当利用和厚朴酚与氟康唑治疗深部感染的系统播散性白色念珠菌病时,氟康唑与和厚朴酚联合使用组的治疗效果比单独使用氟康唑或和厚朴酚的两组效果要更好一些,其小鼠存活率可达到100%,单位肾脏负荷白色念珠菌量最低。最后,本研究对和厚朴酚抗真菌作用机制做了初步的探索,通过激光共聚焦技术,观察了药物作用后的白色念珠菌细胞形态,并且对白色念珠菌细胞内DNA和RNA含量进行了分析,结果表明,和厚朴酚作用后的白色念珠菌体积明显增大,细胞内DNA与RNA的含量也明显增多,说明和厚朴酚可能作用于真菌核酸,阻止真菌分裂生殖。上述实验证明了和厚朴酚与氟康唑联合使用具有协同抗真菌的作用活性,为临床治疗真菌感染提供了新的治疗方案,也为和厚朴酚的进一步研究打下了理论基础。