地胆草有效成分的提取及其多糖的活性研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tiefer34
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
地胆草(Elephantopus scaber Linn.)是广东地区常用中药材之一。其有效成分主要为倍半萜内酯类成分、咖啡酰奎宁酸类成分,具有抗病毒、抗炎、抗菌、抗肿瘤、抗糖尿病、保肝等多种重要活性。然而对于其有效成分的提取工艺研究较少,对其多糖的研究也未见报道。本实验利用柱层析提取方法,对其有效成分的提取进行了研究,同时研究优化了其多糖的提取工艺,并对其多糖的抗氧化活性,免疫调节活性进行了研究。  柱层析法提取地胆草有效成分。以去氧地胆草内酯、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、多糖含量为指标,考察了提取溶剂,溶剂用量,浸泡时间等因素对于有效成分提取率的影响。确定地胆草柱层析提取的最佳工艺为:地胆草全草粉碎过20目、80目筛,留取中间部分粉末作为提取材料,室温下,用石油醚∶乙醇(6∶4)混合溶剂按料液比1∶4.5装入层析柱,浸泡5小时后,以1BV/h的速度洗脱,收集12.5倍提取液后,改用5倍量60%乙醇浸泡1小时,再以1BV/h的速度洗脱,收集15倍提取液后,改用6倍量水浸泡2小时,以1BV/h的速度洗脱,收集18倍提取液。将三种提取液处理后,以高效液相或分光光度法测定其含量,最终与对照方法相比,去氧地胆草内酯、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量高于传统方法,而多糖含量低于传统方法。  地胆草多糖的提取工艺研究。以地胆草多糖提取率为指标,考察了提取温度、提取时间、料液比、提取次数分别对热水浸提法,超声辅助提取法提取地胆草多糖的影响,利用正交设计实验法优化了两者的最佳提取工艺,并对不同前处理工艺,对地胆草多糖热水浸提法的影响进行了比较。最终确定地胆草多糖的最佳提取工艺为:地胆草粉末,用石油醚∶乙醇(6∶4)混合溶剂按料液比1∶4.5装入层析柱,浸泡5小时后,以1BV/h的速度洗脱,收集12.5倍提取液后,改用5倍量60%乙醇浸泡1小时,再以1BV/h的速度洗脱,收集15倍提取液后,将地胆草粉末取出干燥,用热水浸提法,按照料液比1∶15,提取温度70℃,提取时间1h,提取两次浸提地胆草多糖。其多糖提取率高于传统前处理方法。  地胆草多糖的抗氧化活性。脱蛋白除色后的地胆草多糖,采用DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法、总还原力测定,衡量其体外抗氧化能力。结果显示:0.1mg/mL的地胆草多糖对于DPPH自由基的清除率高于同浓度的BHT,可达到80%。在实验条件下0.2mg/mL以下浓度时,地胆草多糖对羟基自由基几乎没有清除效果,之后随着浓度升高其清除效果增强,1mg/mL的地胆草多糖其羟基自由基清除率可达55%左右。地胆草多糖总还原能力在1.0mg/mL时,约等同于0.1mg/mL的抗坏血酸,之后总还原能力随浓度升高而升高。  地胆草多糖的免疫调节活性。脱蛋白除色后的地胆草多糖,利用MTT法测定其小鼠RAW264.7细胞细胞活力影响。结果显示:在地胆草多糖0.125mg/mL至1.25mg/mL的剂量范围内对小鼠RAW264.7细胞具有促进增殖的作用;利用ESILA试剂盒测定了地胆草多糖对于小鼠RAW264.7细胞TNF-α释放的影响,结果显示低浓度(0.125mg/mL)的地胆草多糖,未显示促进TNF-α释放的功能,中浓度(0.625mg/mL)、高浓度(1.25mg/mL)的地胆草多糖,显示了促进TNF-α释放的功能;利用ESILA试剂盒测定了地胆草多糖对于小鼠RAW264.7细胞IL-1β释放的影响,结果显示低浓度(0.125mg/mL)的地胆草多糖,显示促进IL-1β释放的功能,中浓度(0.625mg/mL)、高浓度(1.25mg/mL)的地胆草多糖,未显示促进IL-1β释放的功能。
其他文献
心肌肥厚是常见的心血管疾病的病理改变,其发生发展机制尚不清楚.该研究观察了腺苷(Adenosine,Ade)和氟桂利嗪(Flunarizine,Flu)对左甲状腺素(L-thyroxine,L-Thy)诱发的大鼠左室
目的:研究灵芝多糖(GLPP)的抗氧化作用及探讨其作用机制结果:1.GLPP使血清,心肌匀浆的丙二醛(MDA)水平下降,谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)活性升高,GLPP在高浓度时,使肝组织超氧化物歧化酶(SO
通过文献资料分析,总结了合作学习的定义、方法特征、运用效果与理论依据,综述了体育合作学习的实践活动与研究结果,对体育合作学习的方法与要求作了概要的介绍。
The use of reference is related to the acceptability of a discourse. This paper is a survey of the use of various forms of reference in Chinese discourse. With
该论文在探讨哌嗪季铵盐类化合物的构效关系的基础上,以已发现的己二酰基哌嗪季铵盐(H)和双螺环双哌嗪季铵盐(G)为先导物,设计合成了两个系列(Ⅰ,Ⅱ)化合物.共合成化合物39个,其中有27
本文旨在运用中心语驱动短语结构语法(HPSG)的约束理论对汉语反身代词"自己"的远距离约束现象作出解释."自己"的远距离约束是通过两个步骤实现的,即特征获得和特征匹配.笔者以HPSG的间接性程度统治(obliqueness-command)概念为基础提出了汉语反身代词的约束原则.约束作为一种所指依赖现象,不仅仅是句法问题.句子中心语的语义特征,如自反性,也影响"自己"约束的可接受性.话语因素,如叙述角度,作为句法制约的必要补充,亦应被纳入到约束原则中.
期刊
该研究分离安徽产五步蛇毒纤溶酶FII,探索FII的出血活性及其与出血有关的机制,企图为解释五步蛇毒咬伤后引起局部出血毒性及其是否有应用前景提供理论依据.小结:1、FII小鼠皮
用经济效益确定贫损指标王学杰(开阳磷矿矿务局)矿石开采中贫化损失指标的确定一般参考类似条件矿山或通过试验确定。本文通过对马路坪矿下磷层开采情况的分析,找出贫化损失与矿
土耳其的主要硼酸盐矿床产于马尔马拉湾南部的西安纳托利亚地区。该区东西约300km,南北约150km。主要的硼酸盐区有比加迪奇(Bigadic)、恰尔特勒比克(Kestelek)、苏尔坦卡伊
代谢组学由于处在系统生物学的终端,能更敏感的捕捉到机体的变化。秀丽隐杆线虫(C.elegans)已成为生物学研究的理想模式动物,如发育生物学、遗传学、神经科学等。目前,已有研究