【摘 要】
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人甲状旁腺激素及其类似物作为治疗骨质疏松症的潜在高效药物,其基因工程研究近年来一直是国内外的热点.在该研究计划中,我们试图从生产工艺和药代动力学两个角度来探讨对甲
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人甲状旁腺激素及其类似物作为治疗骨质疏松症的潜在高效药物,其基因工程研究近年来一直是国内外的热点.在该研究计划中,我们试图从生产工艺和药代动力学两个角度来探讨对甲状旁腺激素类似物的修饰和改进.利用该实验室功能基因亚功能片段制备技术平台,在已构建好的甲状旁腺激素N-端34肽融合表达载体pET28ansB-C-Pro-Pro-hPTH(1-34)的基础上,通过加端PCR及PCR突变技术,我们构建出了两个甲状旁腺激素类似物Pro-hPTH(1-38)-Cys(下文简称AC)及Pro-Pro-hPTH(1-38)-Cys(下文简称BC)的融合表达载体pET28ansB-C-Pro-hPTH(1-38)-Cys和pET28ansB-C-Pro-Pro-hPTH(1-38)-Cys,融合蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达并形成了包涵体.通过两个基因工程菌的发酵,融合蛋白的分离纯化,酸水解,小肽的分离纯化,二肽酶切,PEG修饰等步骤最终获得Pro-hPTH(1-38)-Cys,hPTH(1-38)-Cys多肽及hPTH(1-38)-Cys-mPEG-maleimide复合物.
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Financial reform
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