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目的:本课题是在中医药理论的指导下,以中药复方制剂"复方芪麻胶囊"为研究对象,围绕其质量控制难题,综合运用现代分析技术和方法,在其原有质量标准基础上进行优化和提升,按照中药新药质量标准研究技术要求,开展原料药入选标准研究,明确药材来源、产地,并建立复方芪麻胶囊的综合质量控制方法。从整体上有效地控制产品质量,为更好地保证临床疗效奠定基础。方法:1.原料药材的质量标准研究(1)原料药材收集。收集不同产地、不同批次的复方芪麻胶囊7味原料药材(黄芪、天麻、茯苓、法半夏、化橘红、泽泻和川芎等7味药材),并按照2015年版《中国药典》一部项下收载的方法进行检测,采用合格的样品开展后续研究。(2)原料药材指纹图谱研究。采用高效液相色谱(HPLC)法对不同产地、不同批次的原料药材进行指纹图谱研究,分别对样品制备方法和色谱条件进行优选,并完成方法学考察,建立原料药材HPLC指纹图谱,应用国家药典委员会指纹图谱相似度软件进行相似度计算,并结合SPSS软件对得到的指纹图谱进行评价,最终确定各味药材的最佳产地。2.复方芪麻胶囊的质量标准研究(1)薄层定性鉴别。采用薄层色谱(TLC)法对制剂进行定性鉴别研究,并进行方法学考察;(2)含量测定。以君药黄芪所含的黄芪甲苷(ASI)和"打粉入药"天麻所含的天麻素和对羟基苯甲醇三个指标成分为指标,采用HPLC法建立含量测定方法,并进行方法学考察。(3)胶囊剂项下检查。按照胶囊剂项下有关的各项规定(《中国药典》2015年版四部通则0103)对复方芪麻胶囊制剂进行检查项目研究。3.复方芪麻胶囊指纹图谱建立。采用超高效液相(UPLC-DAD)法和高效液相-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法分别建立复方芪麻胶囊UPLC-DAD指纹图谱和HPLC-ELSD指纹图谱,并对所建立方法进行方法学考察。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004年版)进行相似度分析,并通过与阴性对照及药材对照色谱峰进行比对,确定共有峰归属及成分指认。4.复方芪麻胶囊的多指标成分同时测定。采用UPLC法建立多指标成分定量分析方法,并进行方法学考察。结果:1.(1)分别收集了不同来源、不同批号的黄芪15批、茯苓43批、法半夏10批、化橘红11批、天麻12批、泽泻11批和川芎13批,均按照《中国药典》2015年版一部各品种项下有关规定收载方法进行检测,均符合规定,可以应用到后续的研究。(2)建立了复方芪麻胶囊的原料药材(黄芪、茯苓、法半夏、化橘红、泽泻、天麻和川芎等7味药材)HPLC指纹图谱,所建立的HPLC指纹图谱中各共有特征指纹峰分离度均较好,具有较强的专属性。2.(1)优化了复方芪麻胶囊原标准中黄芪、天麻的TLC鉴别方法,新建了复方芪麻胶囊中川芎和化橘红的TLC鉴别方法。(2)建立了复方芪麻胶囊中黄芪的ASI含量和天麻的天麻素及对羟基苯甲醇总含量的测定方法。ASI、天麻素、对羟基苯甲醇分别在1.007～10.064μg(r=0.999 5)、0.080～0.598μg(r=0.999 5)、0.043～0.320 μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为1.79%、0.35%和0.43%。(3)照胶囊剂项下(《中国药典》2015年版第四部通则0103)装量差异、水分、崩解时限和重金属方法进行检查,结果均符合胶囊剂要求。3.建立了复方芪麻胶囊的UPLC指纹图谱和HPLC-ELSD指纹图谱共有模式。在UPLC指纹图谱中标定了 22个共有峰,并对其中8个特征峰进行了指认,分别为6#天麻素、8#5-羟甲基糠醛(5-HF)、14#毛蕊异黄酮葡萄糖苷(CG)、16#野漆树苷、17#柚皮苷、20#芒柄花素葡萄糖苷(FG)、21#毛蕊异黄酮和22#芒柄花素;从HPLC-ELSD指纹图谱中分析得到8个共有峰,并确定了 3#ASI和8#芒柄花素2个成分。10批复方芪麻胶囊样品UPLC指纹图谱和HPLC-ELSD指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均在0.90以上。4.建立了复方芪麻胶囊多指标成分定量分析方法,指标成分天麻素、5-HF、CG、野漆树苷、柚皮苷、FG和毛蕊异黄酮均能达到基线分离,峰形对称。天麻素、5-HF、CG、野漆树苷、柚皮苷、FG和毛蕊异黄酮分别在5.976～29.880 μg·mL-1(r= 1.000 0)、10.596～52.980 μg·mL-1(r=0.999 9)、2.697～13.485 μg mL-1(r=1.000 0)、2.262～11.309 μg mL-1(r= 1.000 0)、40.768～203.840μg·mL-1(r=1.000 0)、5.825～29.126μg·mL-1(r=1.0000)、0.372～1.858μg·mL-1(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)分别为 1.04%、1.30%、1.81%、1.41%、1.29%、1.01%、1.48%,不同批次复方芪麻胶囊天麻素、5-HF、CG、野漆树苷、柚皮苷、FG和毛蕊异黄酮7个指标成分的含量存在差别,含量分别在3.182～3.855 mg·g-1、1.710～3.791 mg·g-1、0.107～0.286 mg·g-1、0.157～0.346 mg·g-1、8.853～10.726 mg·g-1、0.282～0.692 mg·g-1、0.097～0.135 mg·g-1 之间。结论:本论文对中药复方制剂复方芪麻胶囊的质量标准进行了系统性研究,所建立的原料药材和制剂指纹图谱及其定量定性测定分析方法快速、准确、灵敏度高、专属性强,可以有效地控制该制剂的质量。