异黄酮是黄酮类化合物中的一种,主要存在于豆科植物中,大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。由于是从植物中提取,与雌激素有相似结构,因此称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性,是天然的癌症化学预防剂。益生大豆异黄酮是从非转基因大豆精制而成的生物活性物质,是一种具有多种重要生理活性的天然营养因子,是纯天然的植物雌激素,容易被人体吸收,能迅速补充营养。本研究建立了高效液相色谱法（HPLC）同时测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷、黄豆黄素的测定方法。实验考察了不同流动相体系、流动相配比、柱温、流速、进样量等因素对分离的影响,确定了最佳色谱条件:ZORBAXSB-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;二极管阵列检测器,检测波长为255 nm;色谱柱温度20℃,流速:1.0 mL/min,进样体积:5μL。在最佳色谱条件下,建立了各物质的标准曲线,相关系数r为0.9996～0.9999;样品的加标回收率均在83.0～100.6%,方法相对标准偏差在3.0%以内,实现了30 min内对5种化合物的同时测定。研究结果表明,本实验所建立的测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素的高效液相色谱法,具有操作简单,快速、准确、重现性好、检出限低的特点。