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目的:前列腺癌是全球范围内最常见的男性恶性肿瘤之一,严重威胁男性生命健康。在之前的研究工作中,我们发现miR-7靶向KLF4及KLF4/PI3K/p21通路,通过削弱前列腺癌干细胞的干性维持能力抑制前列腺癌细胞的增殖。作为重要的干性转录因子,已发现KLF4能激活或抑制多种基因包括microRNA的转录。因此,结合我们之前的研究工作以及其他前人的研究,在本研究中我们试图探讨在前列腺癌细胞中KLF4是否以及如何调控miR-7的转录并以此调控前列腺癌的增殖及迁移。方法:在前列腺癌细胞系LNCaP中构建稳定敲降KLF4的亚克隆细胞系LNCaP-shKLF4,以及对照细胞系LNCaP-con;结合之前研究工作中已构建的PC3-shKLF4及对照PC3-con细胞系,通过实时荧光定量PCR、染色质免疫共沉淀(ChIP)实验、双荧光素酶报告系统检测稳定敲降KLF4对miR-7以及上皮间质转化相关基因表达的影响;通过细胞增殖实验、平板克隆、3D成球、细胞迁移实验在体外验证稳定敲降KLF4或过表达成熟miR-7模拟物对前列腺癌增殖及迁移的影响;通过免疫共沉淀验证过量入核的YAP是否通过与p72互作导致p72结合依赖的miR-7加工受阻。计数数据采用学生t检验,运用Prism GraphPad5软件进行统计分析和作图。P<0.05认为具有统计学意义。结果:通过本研究我们发现KLF4可以促进miR-7前体分子的转录,结合我们之前的研究结果miR-7在转录后水平上抑制KLF4的表达,表明KLF4与miR-7之间可实现环式互调控并在正常生理状态下实现两者表达的稳态。在前列腺癌细胞中,由于YAP过量入核,竞争性争夺pri-microRNA加工复合物Drosha/p72/DGCR8中的p72,干扰了p72结合依赖的miR-7加工,导致成熟的miR-7产量降低及KLF4过表达从而打破了KLF4-miR-7环式互调控的平衡。通过外源过表达p72可以重建Drosha/p72/DGCR8复合物恢复miR-7产量;此外,也可通过外源过表达成熟的miR-7模拟物规避受阻的加工过程,在体外抑制前列腺癌细胞的增殖。另一方面,稳定敲降KLF4同样可在体外抑制前列腺癌细胞的增殖并同时抑制上皮-间质转化及细胞迁移。结论:在前列腺癌细胞中由于KLF4-miR-7环式互调控平衡的破坏,导致KLF4的过表达及miR-7的表达抑制。稳定敲降KLF4表达或恢复miR-7表达可在体外有效抑制前列腺癌细胞的增殖及迁移。