卡拉胶/琼脂糖复合海绵的制备及对巨噬细胞的免疫调控活性

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目前,免疫系统缺陷所引起的皮肤病及糖尿病并发症所引起的慢性溃疡等疾病的恢复与治疗一直是医学上的难题。此类创伤难以愈合的主要原因在于周边组织的免疫应答不足,无法通过自身免疫系统刺激皮肤组织进行修复。设计开发具有免疫调节功能的活性材料可成为解决该问题的途径之一。卡拉胶是由海洋红藻中提取而出、以硫酸化半乳糖为糖单元的阴离子多糖,是炎症模型的引发药剂,在免疫应答和炎症过程中具有十分重要的作用。制备含卡拉胶组分的生物材料有可能激活免疫系统,实现创伤的加速愈合。本论文针对卡拉胶单独作为生物医用材料使用时力学强度不足等问题,通过使用提纯后的卡拉胶与琼脂糖复合冻干的方法,制备得到三种(κ、ι-和λ-)卡拉胶/琼脂糖质量比为1:1复合海绵。在扫描电子显微镜观察下均显示出蜂窝状的三维孔洞结构。力学性能测试结果表明,三种卡拉胶/琼脂糖复合海绵的韧性相对于单纯的卡拉胶材料均有明显提升。三种卡拉胶/琼脂糖复合海绵的吸水率均达到1600%以上,表现出良好的吸水性能。此外,由于琼脂糖和卡拉胶均能在人体生理温度下达到溶胶-凝胶平衡,使得该海绵材料可缓慢释放卡拉胶,进而对巨噬细胞产生免疫刺激活性。在卡拉胶的溶出释放测试中,三种复合海绵中的卡拉胶都能随时间缓慢释放,其中λ-卡拉胶/琼脂糖复合海绵的释放量最大,24h累计释放量为42.0%。同时,κ、ι-卡拉胶/琼脂糖复合海绵具有良好的细胞相容性,对于RAW264.7巨噬细胞和NIH-3T3成纤维细胞均无细胞毒性。λ-卡拉胶/琼脂糖复合海绵对NIH-3T3细胞有轻微细胞毒性。三种复合海绵都能加速RAW264.7巨噬细胞的迁移,同时可对其分泌细胞因子mRNA的表达量进行调节。卡拉胶/琼脂糖复合海绵对RAW264.7巨噬细胞因子mRNA表达量的影响模式符合皮肤修复的时间轴,因此在皮肤敷料等方面的应用有较大的潜力。综合本研究中所进行的测试、实验结果,在三种卡拉胶/琼脂糖复合海绵中,ι-卡拉胶/琼脂糖复合海绵的综合性能最为理想。
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