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山楂是药食同源的上等补品,具有消食健胃、活血化瘀、降血压、降血脂、增进冠状动脉血流量、防治冠心病和心绞痛以及抗癌、防癌等多重功效,其已有3000多年的栽培历史,其中C. pinnatifida var. major山楂是我国最常见的栽培品种,其果实因富含具有抗氧化功效的生物类黄酮成分(金丝桃苷、异槲皮苷和表儿茶素含量尤其丰富)而广泛地被用作营养食品的天然原材料。为此,本研究精选C. pinnatifida var. major山楂作为试验材料,旨在探索其果皮多酚(HPP)和果肉多酚(HFP)的抗肿瘤活性和潜在血管营养功能。细胞实验选取处于对数生长期的MCF-7人乳腺癌细胞作为试验对象,采用MTT比色法检测肿瘤细胞的存活能力、LDH法测定山楂果皮、果肉多酚对肿瘤细胞的细胞毒性;利用流式细胞仪分析肿瘤细胞的周期分布情况和肿瘤细胞中活性氧的水平、双变量流式细胞仪分析肿瘤细胞凋亡情况,试剂盒法检测细胞凋亡相关蛋白caspase的活性,系统地研究了山楂果皮多酚和果肉多酚对乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤功效及作用机制。此外,还利用化学发光分析法评估了山楂果皮、果肉多酚在模拟人体胃液环境下促进NO2还原释放NO的作用。主要研究结果如下:(1)利用80%乙醇溶液提取山楂果皮和果肉多酚,提取率分别为27.3%和11.6%。试验测得山楂果皮多酚提取物中总多酚与总黄酮含量分别为441.2、357.9μg/mg;果肉提取物中总多酚与总黄酮含量分别为176.8.117.8μg/mg。同时,利用常规的HPLC-UV检测技术分析其多酚组成发现,山楂果皮多酚提取物中含有矢车菊素半乳糖苷、绿原酸、表儿茶素、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素六种单体,其含量分别为13.4.18.5.199.0,22.1.15.7.2.3μg/mg而在山楂果肉提取物中仅检测到表儿茶素、矢车菊素半乳糖苷、绿原酸、槲皮素四种单体,其含量分别为40.5.4.3.2.6.1.5μg/mg。(2)体外抗肿瘤实验结果表明,山楂果皮多酚和果肉多酚均具有明显的抗癌活性,且其抗癌功效呈现出剂量、时间依赖效应。MTT和LDH检测结果显示,山楂果皮、果肉多酚对人乳腺癌MCF-7细胞具有明显的生长抑制作用,其对MCF-7细胞的半数致死剂量分别为88.6μg/mL和175.5μg/mL。此外,利用流式细胞仪分析细胞周期分布和凋亡情况发现,山楂果皮多酚和果肉多酚均能诱导细胞周期阻滞于S期,同时还明显地促进了细胞的凋亡,200μg/mL的山楂果皮多酚作用于MCF-7细胞后,37.8%的细胞进入早期凋亡。由此推断山楂果皮多酚和果肉多酚对MCF-7细胞的生长抑制作用是通过诱导细胞周期阻滞和促进细胞凋亡而实现的。(3)进一步探究肿瘤细胞的凋亡机制发现,用山楂果皮多酚和果肉多酚处理MCF-7细胞后,细胞内凋亡相关蛋白caspase3和caspase9的活性明显升高,而且胞内活性氧水平也有显著上升,由此判定山楂果皮多酚和果肉多酚参与了线粒体凋亡通路。(4)利用化学发光法分析山楂果皮、果肉多酚在酸性条件下促进NO2还原的能力,结果表明山楂果皮多酚和果肉多酚均能有效地促使NaNO2还原,释放NO。本研究首次分析并比较了山楂果皮和果肉多酚的组成结构,系统地研究了其抗肿瘤活性和血管营养潜能,对充分发掘山楂的食品保健作用以及药理活性具有积极意义,同时为开发新型无副作用的以山楂为材料的癌症预防制剂和心血管保护药物提供了科学依据。