论文部分内容阅读
【目的】1降低特异性雌激素受体显像剂18F-氟雌二醇（18F-Fluoroestradio，18F-FES）的合成成本，完善质量控制项目，满足临床用量及安全性需求。2明确18F-FES对不同乳腺癌雌激素受体（Estrogen receptor，ER）表达水平细胞的示踪作用，并初步探讨其机制。【方法】1正交试验（L1645）考察影响全自动合成装置（Tracerlab FXFN）自动化合成18F-FES的因素，指标为前体量（mg）、核素量（mci）、乙腈使用次数（次）、盐酸浓度（mol/L）、水解温度（℃），以合成率为主要判断标准，优选最佳合成条件。2根据获得的最佳合成条件，比较使用国产及进口两种前体18F-FES的合成率及合成成本。3合成18F-FES的质量控制及建立细菌内毒素方法学。4体外培养人乳腺细胞株（MCF-10A）及乳腺癌细胞株（MCF-7，MDA-MB-231），分别加入18F-FES1.85×105Bq（5μCi）孵育15、30、60、90、120和150min后，采用γ放射计数器测定放射性计数（CPM），分析细胞18F-FES摄取量。5ER拮抗剂他莫昔芬（Tamoxifen，TAM）（5、10、20μmol/L）处理MCF-7细胞24、48、72h，MTT法测定细胞增殖；TAM处理72h的MCF-7细胞，加入18F-FES1.85×105Bq（5μCi）孵育60min，免疫组化技术（immuno-histochemistry，IHC）测定细胞ER表达，γ放射计数器测定CPM，分析细胞18F-FES摄取量。【结果】l影响18F-FES合成的重要因素为：乙腈使用次数>前体量>温度>核素量>盐酸浓度；合成率高低与国内外前体来源无关，使用国内前体合成成本低。2建立的细菌内毒素检查方法显示，18F-FES注射液每1mL含细菌内毒素量应<5EU（EU，内毒素单位），其1∶10倍的稀释液对细菌内毒素试验无干扰作用。3体外培养的三种细胞株对18F-FES均有明显摄取，18F-FES孵育90min摄取达峰。乳腺癌ER阳性的MCF-7细胞摄取值远大于ER阴性的MDA-MB-231细胞及MCF-7细胞。4ER拮抗剂TAM明显抑制MCF-7细胞增殖，呈时间剂量依赖性。细胞数减少，ER减少，MCF-7细胞18F-FES摄取值明显下降。【结论】1在选定条件下，18F-FES的合成率较高，国产前体可替代进口前体，不影响合成率，合成成本明显降低；已建立的细菌内毒素方法学及完善的质量控制项目，可确保合成的18F-FES显像剂安全、可靠、价廉。2自主合成的18F-FES与体外乳腺癌细胞株ER呈特异性结合，其摄取量与细胞ER表达水平有关。