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骨缺损在临床上的整复治疗备受关注。传统自体骨移植具有不可避免的二次损伤并且伴随着感染、疼痛等风险的可能。人工骨代用品成骨性低、个体差异性大,并且还存在因其抗原性引起的体内长期排斥与降解速度慢造成的异物反应等缺点。组织工程骨有望成为临床修复下颌骨缺损的理想替代品。目的:探索建立以同种异体家兔胎龄期骨髓间充质干细胞为种子细胞构建组织工程骨的可行性。方法:通过人工受精方法,获得孕期3周的孕兔1只,行剖腹产术取出胎兔7只,冲取胎兔骨髓以贴壁培养法进行体外扩增培养。另16只成年新西兰大白兔无差别分为实验组与空白材料对照组,各8只。取P3代胎龄期BMSCs以20×106 cells/ml的浓度接种DBM继续培养诱导。用经诱导的BMSCs-DBM修复实验组家兔桡骨1.5cm节段缺损,用空白DBM材料按同样手术方法修复空白对照组家兔。术后不同时间进行随访与X线观察。术后12周两组家兔均实行空气注射栓塞致死,行取材后大体观察、Micro-CT影像学检测、组织学染色等检测指标评价修复效果。同时对胎龄期家兔BMSCs行相应数据检测,测量P3代胎兔骨髓间充质干细胞的生长曲线,克隆形成率,并进行成骨、成脂及成软骨诱导分化。另外将原代细胞冻存后30天复苏,测量其P3代生长曲线,对冻存前后增殖能力的变化进行观察。扫描电镜观察胎兔骨髓间充质干细胞与DBM形成细胞材料复合物的体外形态。将BMSCs-DBM复合物植入裸鼠皮下,于术后1、3、6月分别取材行HE、VG、Masson染色观察。结果:胎兔来源的骨髓间充质干细胞倒置相差显微镜下观察细胞饱满均匀,呈梭形或倒三角形状;传代后各代细胞形态未发生明显变化,生长曲线相差不大;成骨、成脂以及成软骨诱导观察到钙结节、脂肪空泡、黏多糖。冻存30天后复苏,其P3代生长曲线与冻存前相比未见明显变化。电镜下观察,与DBM复合7天后细胞能均匀紧密贴合于材料上,伸展良好分布均匀。植入裸鼠皮不同时间点取材进行HE、VG、Masson染色,均显示有新生骨组织生成。诱导BMSCs-DBM植入缺损后通过X线发现阻摄影不断增高,12周大体和Micro-CT见骨愈合。结论:1.家兔来源的骨髓间充质干细胞(BMSCs)经过一系列观察与试验,证明是一种易获取、诱导分化能力较强、与生物材料结合较好的骨组织工程种子细胞。2.单纯脱钙骨基质(DBM)作为单纯生物材料不能修复家兔桡骨标准节段骨缺损。3.同种异体胎龄期骨髓间充质干细胞(BMSCs)结合脱钙骨基质(DBM)构建的组织工程骨能修复兔桡骨原位缺损模型。