角蝉总科(昆虫纲:半翅目)部分种类线粒体基因组及分子系统发育的研究

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角蝉总科Membracoidea隶属于半翅目Hemiptera头喙亚目Auchenorrhyncha,世界上已经描述的种类约3100余种。叶蝉与角蝉的关系一直存在争议,即角蜱总科内是否应该包括叶蝉(广义角蝉总科包括叶蝉科,而狭义角蝉总科只包括角蝉科);广义角蝉总科、沫蝉总科、蝉总科3总科之间的系统发育关系存在不同的观点;角蝉科露盾亚科内部的族级关系比较混乱。现在还没有关于角蝉线粒体基因组全序列的报道。为了解决以上问题,我们测定了10种角蝉、2种叶蝉、1种蝉的线粒体基因组全序列。  本研究设计了一整套角蝉总科昆虫通用的线粒体基因扩增引物用于角蝉线粒体基因组的PCR扩增;对部分长片段序列和A+T区采用Long-PCR扩增和体外克隆测序的方法。测序结果经分析、拼接、组装、注释后,对线粒体基因的组织结构及序列特征进行了分析,包括线粒体基因组的基因组成、排列顺序,A+T区结构,13种PCGs特点、22种tRNA基因二级结构等。研究结果表明角蝉总科昆虫线粒体基因组与其他昆虫线粒体基因组类似。  本研究利用测序得到的线粒体基因组数据结合GenBank中已经测序的27种半翅目昆虫线粒体基因组序列数据重建了蝉子亚目和半翅目昆虫的系统发育树。在重建的蝉子亚目系统发育关系中,角蝉科露盾亚科内部各族之间的系统关系为:高冠角蝉族+(弧角蝉族+露盾角蝉族+矛角蝉族+(结角蝉族+三刺角蝉族));分子系统树显示广义角蝉总科内部昆虫的前胸背板的形态存在进化关系;同时结果还支持广义角蝉总科与(沫蝉总科+蝉总科)构成姐妹群,叶蝉科与(角蝉科+犁胸蝉科)构成姐妹群的假设。重建的半翅目系统发育关系结果与传统观点不符,异翅亚目为单系群,而蝉子亚目不是单系群,推测其原因可能是由于各总科取样不平衡造成的。我们在实验中设计的通用引物可以成功扩增出角蝉总科昆虫线粒体基因组全序列,为以后快速、精确地完成大量角蝉总科昆虫线粒体基因组全序列的测序工作打下了良好基础。实验获得的线粒体基因组序列数据对角蝉总科及半翅目昆虫线粒体基因组的分子进化和系统发育研究具有重要意义。
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