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目的:观察电针和骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植联合应用对脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)病灶及周围微环境的影响,探讨神经元修复的机制。方法:1.将复苏的BMSCs培养融合度达80%时,将培养液更换为预诱导液培养24小时,然后再更换为无血清诱导液诱导6h。收集细胞备用。2.采用胶原酶及肝素注入尾状核制备大鼠ICH模型。3.术后分别在2h、24h、48h时间点对SD大鼠进行神经功能评分(Neurological Severity Score,NSS)评分,评分大于9分者则纳入实验。并随机分为:对照组(Control组)、细胞移植组(BMSCs组)、电针与细胞移植联合组(electro-acupuncture combined with BMSCs transplantation, Ea BMSCs组)。4.在术后第3天时通过脑立体定位仪导航,将20μ10.9%生理盐水(Normal saline, NS)和20μlBMSCs悬液移植入ICH大鼠病灶中。每组根据移植后喂养天数再分为:1d、3d、5d、7d、14d五个亚组。移植2h后,对EaBMSCs组取大椎穴和百会穴,进行电针治疗,每天一次,直至处死。5.对各组SD大鼠临处死取材时,再行NSS评分一次。6.通过蛋白免疫印迹(Wetern Blotting, WB)方法检测各组在不同时间点神经生长因子(nerve growth factor, NGF)、脑源性神经营养因子(brain derived neurophic factor, BDNF)、β-微管蛋白(tubulin)Ⅲ及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase, GAPDH)蛋白表达变化情况。结果:1.制备大鼠ICH模型成功后,移植细胞前对Control组、BMSCs组、Ea BMSCs组进行NSS评分,各组之间评分无显著性差异;移植后第5天时,BMSCs组评分低于Control组,差异显著(P<0.05);Ea BMSCs组(除1d外)较Control组差异显著(P<0.05),神经功能缺失症状改善明显。2.EaBMSCs组和BMSCs组的NGF蛋白表达明显增加;于移植后7天、14天,BMSCs组较Control组NGF蛋白表达增加显著(P<0.05);与BMSCs组和Control组比较(除1d外),Ea BMSCs组大鼠ICH病灶周围NGF蛋白表达上调更明显,差异显著(P<0.05)。3.移植后5天、7天、14天时,Ea BMSCs组和BMSCs组较Control组,BDNF蛋白表达明显增加,差异显著(P<0.05);在移植后第3天、5天、14天,Ea BMSCs组较BMSCs组BDNF蛋白表达增加明显,差异显著(P<0.05)。4.在同一时间点,Ea BMSCs组和BMSCs组与Control组比较,β-tubulinⅢ蛋白表达明显增加;在移植后5天、7天、14天,BMSCs组较Control组增加明显,差异显著有统计学意义;Ea BMSCs组(除移植1天)均较BMSCs组明显增加,差异显著有统计学意义。结论:1.外源性BMSCs移植可使大鼠ICH病灶周围NGF和BDNF蛋白表达增加,保护神经元。2.电针和BMSCs联合应用,较单纯BMSCs移植更能上调NGF和BDNF蛋白表达,改善出血灶及周围的微环境,更利于内外源性神经元的存活。3.电针和BMSCs移植联合应用,较单纯BMSCs移植更能上调β-tubulinⅢ蛋白表达,改善ICH大鼠神经缺失症状和促进其运动和感觉功能恢复。4.NGF和BDNF蛋白表达持续时间有一定相似性。