BMSCs移植和电针联合应用对脑出血大鼠神经元修复的实验研究

来源 :泸州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weiguoliaaaa
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察电针和骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植联合应用对脑出血(intracerebral hemorrhage, ICH)病灶及周围微环境的影响,探讨神经元修复的机制。方法:1.将复苏的BMSCs培养融合度达80%时,将培养液更换为预诱导液培养24小时,然后再更换为无血清诱导液诱导6h。收集细胞备用。2.采用胶原酶及肝素注入尾状核制备大鼠ICH模型。3.术后分别在2h、24h、48h时间点对SD大鼠进行神经功能评分(Neurological Severity Score,NSS)评分,评分大于9分者则纳入实验。并随机分为:对照组(Control组)、细胞移植组(BMSCs组)、电针与细胞移植联合组(electro-acupuncture combined with BMSCs transplantation, Ea BMSCs组)。4.在术后第3天时通过脑立体定位仪导航,将20μ10.9%生理盐水(Normal saline, NS)和20μlBMSCs悬液移植入ICH大鼠病灶中。每组根据移植后喂养天数再分为:1d、3d、5d、7d、14d五个亚组。移植2h后,对EaBMSCs组取大椎穴和百会穴,进行电针治疗,每天一次,直至处死。5.对各组SD大鼠临处死取材时,再行NSS评分一次。6.通过蛋白免疫印迹(Wetern Blotting, WB)方法检测各组在不同时间点神经生长因子(nerve growth factor, NGF)、脑源性神经营养因子(brain derived neurophic factor, BDNF)、β-微管蛋白(tubulin)Ⅲ及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase, GAPDH)蛋白表达变化情况。结果:1.制备大鼠ICH模型成功后,移植细胞前对Control组、BMSCs组、Ea BMSCs组进行NSS评分,各组之间评分无显著性差异;移植后第5天时,BMSCs组评分低于Control组,差异显著(P<0.05);Ea BMSCs组(除1d外)较Control组差异显著(P<0.05),神经功能缺失症状改善明显。2.EaBMSCs组和BMSCs组的NGF蛋白表达明显增加;于移植后7天、14天,BMSCs组较Control组NGF蛋白表达增加显著(P<0.05);与BMSCs组和Control组比较(除1d外),Ea BMSCs组大鼠ICH病灶周围NGF蛋白表达上调更明显,差异显著(P<0.05)。3.移植后5天、7天、14天时,Ea BMSCs组和BMSCs组较Control组,BDNF蛋白表达明显增加,差异显著(P<0.05);在移植后第3天、5天、14天,Ea BMSCs组较BMSCs组BDNF蛋白表达增加明显,差异显著(P<0.05)。4.在同一时间点,Ea BMSCs组和BMSCs组与Control组比较,β-tubulinⅢ蛋白表达明显增加;在移植后5天、7天、14天,BMSCs组较Control组增加明显,差异显著有统计学意义;Ea BMSCs组(除移植1天)均较BMSCs组明显增加,差异显著有统计学意义。结论:1.外源性BMSCs移植可使大鼠ICH病灶周围NGF和BDNF蛋白表达增加,保护神经元。2.电针和BMSCs联合应用,较单纯BMSCs移植更能上调NGF和BDNF蛋白表达,改善出血灶及周围的微环境,更利于内外源性神经元的存活。3.电针和BMSCs移植联合应用,较单纯BMSCs移植更能上调β-tubulinⅢ蛋白表达,改善ICH大鼠神经缺失症状和促进其运动和感觉功能恢复。4.NGF和BDNF蛋白表达持续时间有一定相似性。
其他文献
目的:通过对维药异黑成熟剂主要活性成分定性、定量及α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究,为异黑成熟剂的质量控制提供更加稳定、可靠的方法,为其在临床应用及开发提供相应研究数据。
《论语》集中地记录了孔子及其弟子的言行,也是记载儒家思想的经典之作。虽然当时对于文艺的讨论处于不自觉的时代,《论语》中仍然体现了儒家伊始对文艺的基本观点。《淮南子
目的观察老年维持性血液透析(MHD)患者血清胱抑素C水平变化,并分析其与颈动脉斑块稳定性的关系。方法选取80例老年MHD患者纳入病例组,30例建康体检者为对照组。采用自动生化
目的研究在促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)和胰岛素(INS)刺激作用下多囊卵巢综合症(PCOS)病人与正常卵巢的颗粒细胞甾体激素产生的异同。方法对18例月经周期正常妇女卵泡期的33个卵泡和8例PCOS的100个卵
目的比较4种皮肤消毒剂的使用效果及时间,探讨更方便临床使用且效果更好的消毒剂。方法将4种皮肤消毒剂分成3组,碘酒、乙醇为一组,碘伏、安尔碘各为一组;受试组不知使用的目
目的 了解综合性医院传染病发病及流行的特点 ,探讨减少医院门诊交叉感染的措施。方法 对我院近两年接诊的 2 36例传染病病因和特点进行调查分析。结果  2 36例传染病中细
研究目的:工竹元旦加错的著作《工竹札记》是藏医临床的重要书籍之一。本书自从康区问世以来,逐渐在整个藏区广泛传播,供藏医学者研究、学习和使用。该书以四部医典的密诀续为主
目的探讨脂联素(ADPN)、血肌酐(Scr)、血清胱抑素(Cys)-C水平与维持血液透析(MHD)患者心血管事件的关系。方法血液净化中心185例MHD患者分别于治疗前及治疗期间每3个月检测患
目的:观察脑府逐瘀汤佐治急性重型颅脑损伤脑府积瘀证的临床疗效,探讨脑府逐瘀汤对重型颅脑损伤急性期的脑保护和治疗作用。方法:62例重型颅脑损伤急性期脑府积瘀证的住院病人(
在社会经济发展和网络文化盛行的各种思潮冲击下 ,我国传统的思想观念和文学形态发生着剧烈的变化。从 2 0世纪 90年代后期开始的“文学新生代”文学现象 ,在日趋凸显个人化