目的:细胞氧化还原反应中的关键因子Nrf2在癌症的预防和治疗中的作用是研究的热点,但因Nrf2特殊的双重作用,其在前列腺癌进展中发挥作用的机制目前尚不清楚。定位于高尔基体的Golgi phosphoprotein-3(GOLPH3)与前列腺癌的演进高度相关,促进前列腺癌由激素依赖性向去势抵抗性转化,其表达水平的增高意味着前列腺癌侵袭性的增强。本文拟从氧化还原反应及GOLPH3的角度,探讨Nrf2的表达对前列腺癌细胞增殖的影响及其产生作用的机制。方法:1)培养激素依赖性人前列腺癌细胞LNCa P,及去势抵抗性人前列腺癌细胞DU-145,显微镜观察其生长状况;2)蛋白印迹(Western Blot)检测Nrf2蛋白在LNCa P及DU145中的表达;3)流式细胞仪检测LNCa P及DU145细胞内活性氧含量;4)重组质粒p EGFP-Nrf2、空载质粒p EGFP-N1分别瞬时转染LNCa P和DU145细胞,分别形成LNCa P-Nrf2-OE、LNCa P-Con及DU145-Nrf2-OE和DU145-Con细胞,5)分别将重载质粒、空载质粒的LNCa P和DU145细胞制成细胞蜡块,免疫组化法检测两组细胞中的GOLPH3蛋白表达情况;6)蛋白印迹(Western Blot)检测重载质粒、空载质粒的LNCa P和DU145细胞中GOLPH3蛋白的表达情况;7)实时荧光定量(RT-PCR)检测Nrf2过表达对GOLPH3 m RNA在重载质粒、空载质粒的LNCa P和DU145细胞中的表达的影响;8建立Keap1过表达的LNCa P-Nrf2-OE-Keap1与DU145-Nrf2-OE-Keap1,和抑制GOLPH3表达的LNCa P-Nrf2-OE-GOLPH3L、DU145-Nrf2-OE-GOLPH3L,MTT法绘制重载质粒、空载质粒、Keap1过表达和GOLPH3抑制的LNCa P和DU145的生长曲线;9)软琼脂细胞集落形成实验分别检测重载质粒、空载质粒、Keap1过表达和GOLPH3抑制的LNCa P组和DU145组细胞集落形成的差异。结果:1)DU145胞生长速度较LNCa P细胞生长速度快;2)Western blot结果显示,Nrf2蛋白在LNCa P细胞中的表达较DU145高;3)LNCa P细胞内活性氧含量较DU145高;4)细胞蜡块免疫组化及Western blot结果显示,Nrf2过表达可降低GOLPH3蛋白在两种前列腺癌细胞中的表达;5)RT-PCR结果显示,Nrf2过表达可降低GOLPH3 m RNA在两种前列腺癌细胞中的表达;6)MTT法检测结果显示,Nrf2的过表达可使前列腺癌细胞生长速率明显减慢,Keap1的过表达可使细胞生长速率增快,Keap1对LNCa P-Nrf2-OE的作用比DU145-Nrf2-OE明显,GOLPH3L可使细胞生长速率增快;7)软琼脂细胞集落形成实验结果显示,Nrf2的过表达可抑制细胞集落形成,Keap1抑制Nrf2的作用促进细胞集落形成,且Keap1对LNCa P-Nrf2-OE的作用比DU145-Nrf2-OE明显,GOLPH3L显著促进LNCa P-Nrf2-OE和DU145-Nrf2-OE的体外集落形成能力。结论:Nrf2通过维持细胞内氧化还原稳态及降低GOLPH3的表达来抑制前列腺癌细胞的增殖及集落形成。