3D打印的多巴胺接枝的羧甲基纤维素水凝胶微针用于大鼠腹壁缺损修补的实验研究

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背景腹壁疝(Abdominal hernia)是外科临床上的常见病,指腹腔内容物通过腹壁缺损永久性或复发性突出于腹腔外,补片修补是临床上治疗该疾病的常用方法。目前临床上的常用补片虽具有较好的机械强度,但是由于其不可吸收,长期留存在局部,给患者带来一系列的副作用,包括疼痛、感染、甚至复发等,临床上关于腹壁疝的手术方式多种多样,但都需要传统的缝线或者钉枪固定补片,这不仅不利于术后恢复且延长了手术时间,并且对于术者的手术操作具有较高的要求。目的设计一种具有在湿态下高粘附性、较强机械强度的水凝胶补片。方法本研究通过将多巴胺(Dopamine,DA)接枝于羧甲基纤维素(Carboxymethyl cellulose,CMC),并加入不同比例的聚乙烯醇(Poly(vinyl alcohol),PVA),从而得到CMC-DA/PVA水凝胶,并将CMC-DA/PVA水凝胶及3D打印的热塑性聚氨酯弹性体(Thermoplastic Urethane,TPU)网片灌入微针(Microneedles,MNs)模具内,从而得到了CMC-DA/PVA水凝胶MNs补片,通过核磁、紫外分光光度计、扫描电镜检测水凝胶MNs的结构,并测定水凝胶MNs的机械强度、力学性能、粘附性及细胞相容性。最后将30只SD大鼠根据随机数表法分为对照组(聚丙烯补片组)、MNs surface组及Smooth surface组,每组各10只,建立腹壁缺损大鼠模型,聚丙烯补片组将补片用丝线缝合于缺损边缘。于14天、28天分次处死大鼠,切取缺损上方肉芽组织,光镜下观察新生肉芽组织病理形态学改变,检测相关炎症指标、CD31及α-SMA的表达情况。计量资料通过均数±标准差(Mean±SD)的方式表示,若方差齐两组间比较采用两独立样本t检验,方差不齐时则用秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果所制备的CMC-DA/PVA水凝胶MNs补片在280nm处可见特征性吸收峰,证明CMC已成功接枝在DA上,扫描电镜下可见微针结构,利用万能力学机测定水凝胶MNs补片的力学性能,证明因TPU网片的加入,提高了整体水凝胶MNs的机械强度,弥补了该水凝胶MNs作为腹壁缺损修复补片的短板,并且通过搭接剪切试验证明湿态下具有高粘附性。体外细胞实验表明,CMC-DA/PVA水凝胶MNs补片能显著促进大鼠全层腹壁缺损的修复。组织形态学评价表明,与临床使用的商用聚丙烯网片相比,设计的水凝胶补片促进胶原蛋白的形成,诱导新生血管生长,促进腹壁组织厚度的增加及腹壁完整性的重建,并且通过降低IL-6、TNF-α和IL-1β的表达来抑制炎症反应。同时,3D打印支架存在,可根据腹壁缺损进行个体化设计。结论CMC-DA/PVA水凝胶MNs补片具有较好的机械强度、湿性条件下高粘附性,并且能够促进新生肉芽组织生长,抑制炎症因子表达,同时,该水凝胶补片可根据腹壁缺损进行个体化设计,这种新型的水凝胶补片在治疗全层腹壁缺损方面具有巨大的潜力。
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