由尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc）引起的香蕉枯萎病是香蕉生产上最具毁灭性的病害之一,其中以4号生理小种（Foc4）引致的枯萎病危害最为严重。在本研究室前期开展的Foc4分泌蛋白质组研究中,发现多胺氧化酶（polyamine oxidase,PAO）的表达在受到香蕉根组织提取物诱导后显著上调,推测其可能参与Foc4的致病过程。目前,关于Foc4中多胺氧化酶的基因功能研究尚未见报道。本论文通过基因敲除、基因回补、表型观察、致病性分析等方法,首次对Foc4中多胺氧化酶的基因功能进行了研究。具体结果如下:（1）对Foc4中多胺氧化酶基因（Fo Pao）的表达进行了q RT-PCR分析。结果表明,在香蕉根组织提取物诱导不同时间后,Foc4中Fo Pao的表达量显著上调。（2）利用生物信息学方法对Foc4中多胺氧化酶进行了分析。结果表明,经Signal P4.1、Wo LF PSORT和TMHMM v2.0等软件分析,发现多胺氧化酶具有N-端信号肽,属于分泌蛋白,其分泌途径未知。进一步分析发现多胺氧化酶基因全长为1982 bp,编码527个氨基酸,含有氨基氧化酶（Amino oxidase）结构域和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）结合位点。进化树分析发现,多胺氧化酶在许多镰刀菌中有高度同源蛋白,有很好的保守性;此外,在Foc4中还存在另一个编码多胺氧化酶的基因,两者在基因序列上有66.8%的相似性,在氨基酸序列上有69.6%的相似性。（3）采用同源重组的基因敲除策略,成功构建了含有潮霉素筛选标记的敲除载体;通过PEG介导的原生质体转化法,经潮霉素抗性筛选、PCR分析、Southern blot鉴定,获得了3个Foc4的多胺氧化酶基因的敲除突变体（ΔFo Pao）。通过基因回补,成功构建了含有博来霉素筛选标记的回补载体;采用原生质体转化法获得了4个多胺氧化酶基因的回补突变体（ΔFo Pao-7-com）。（4）对ΔFo Pao的表型分析表明,与Foc4野生型相比,ΔFo Pao的产孢量及菌丝干重显著升高,但在菌落生长、分生孢子形态、菌丝形态、穿透能力及对苹果的定殖能力上无明显差异;对其抗胁迫能力的分析结果表明,ΔFo Pao与Foc4野生型在含有1 mol/L Na Cl、1 mol/L山梨醇和10 mmol/L Li Cl的PDA培养基上,其生长无明显差异;对其细胞壁完整性试验结果表明,Fo Pao的缺失不影响Foc4的细胞壁完整性;对其耐受外源多胺的敏感性试验结果表明,Fo Pao的缺失不影响Foc4在含有5 mol/L亚精胺的PDA培养基上的菌落生长;外源添加PAO抑制剂的试验结果表明,与Foc4野生型相比,在低抑制剂浓度下,ΔFo Pao的菌落边缘稀疏,在高抑制剂浓度下,ΔFo Pao的菌落无明显差异。在上述表型、抗胁迫能力、细胞壁完整性、以及外源多胺等耐受性试验中,ΔFo Pao-7-com都与Foc4野生型没有明显差异。（5）采用q RT-PCR技术,对ΔFo Pao侵染巴西蕉后的相对生物量进行分析。结果表明,在接种后24 h和48 h,ΔFo Pao在巴西蕉根部的生物量显著高于Foc4野生型,而ΔFo Pao-7-com则恢复至Foc4野生型水平。（6）对ΔFo Pao致病性分析表明,ΔFo Pao接种巴西蕉后的叶片黄化面积和球茎的褐变面积显著高于接种Foc4野生型的巴西蕉;病情指数统计结果也表明ΔFo Pao的致病性显著高于Foc4野生型,而ΔFo Pao-7-com接种巴西蕉的病情指数则与Foc4野生型无显著差异;上述结果表明敲除Fo Pao导致了Foc4致病性的增强。（7）为了分析ΔFo Pao致病性增强的原因,进一步对其镰刀菌酸的合成以及多胺代谢通路相关基因的表达进行了分析。结果表明,与Foc4野生型相比,ΔFo Pao中镰刀菌酸的合成显著升高;采用q RT-RCR技术对多胺代谢通路相关基因的表达进行了分析,与Foc4野生型相比,在香蕉根组织物诱导后12 h和24 h,ΔFo Pao中参与腐胺合成的鸟氨酸脱羧酶基因（Fo Odc）表达显著上调;在诱导24 h后,其亚精胺合成酶基因（Fo Spe）表达量上调幅度下降;精胺/亚精胺N1-乙酰基转移酶基因（Fo Ssat）Fo Ssat基因则在受到诱导后不再上调表达。对编码多胺次级代谢调节因子的Lae A基因进行了q RT-RCR分析表明,Fo Pao基因的缺失导致Foc4无论是否受到诱导,其表达量均低于Foc4野生型。