斑马鱼(Danio rerio)是一种热带淡水硬骨鱼,具有体型小、易繁殖、生殖周期短、胚胎发育透明等特点。作为国际标准化组织认可的模式动物,目前已被广泛应用于遗传发育、肿瘤生物学、分子生物学、药物筛选、毒性试验及环境监测等诸多领域。血液是对环境变化比较敏感的组织,环境变化必然会引起机体血液指标的改变。目前,关于系统探究重金属对斑马鱼外周血毒性作用的研究很少,本文从血细胞形态学和血液指标变化等方面探讨重金属铜对斑马鱼的影响,为重金属铜的毒性作用机制的进一步研究和环境监测部门水质标准的制定提供理论基础和参考依据。试验Ⅰ 斑马鱼外周血细胞形态结构应用光镜和电镜对斑马鱼外周血细胞进行观察。斑马鱼外周血涂片后,经瑞氏染色后,通过光镜观察,可区分出以下各种类型的血细胞:红细胞,大、小淋巴细胞,血栓细胞,单核细胞,嗜中性、嗜酸性。此外,在外周血中还可见少量未成熟的红细胞及正在分裂的红细胞,提示红细胞可在外周血直接分裂。嗜酸性和嗜碱性粒细胞在头肾以及脾脏等造血器官中数量较多,在外周血中数量很少。头肾中可观察到血细胞发育的各个阶段,电镜下可见,红细胞内基本不含任何细胞器,各种粒细胞的超微结构和哺乳动物相应细胞的颗粒差别不大。试验Ⅱ重金属铜对斑马鱼急性毒性研究及安全浓度评价试验采用静水式生物测试的方式,以斑马鱼为试验材料进行重金属铜的急性毒性研究,测定出铜离子暴露下斑马鱼96h的半数致死浓度,并计算安全浓度。结果表明,铜对斑马鱼96h的半数致死浓度是0.431mg/L,安全浓度为0.043mg/L,属剧毒物质。试验Ⅲ重金属铜对斑马鱼外周血的影响将斑马鱼分别暴露于0mg/L,0.05mg/L,0.1mg/L,0.2mg/L四个浓度的硫酸铜溶液中4d,研究铜离子对斑马鱼外周血红细胞微核率、核异常率、红细胞大小和各类白细胞数量的影响,探讨铜离子对斑马鱼的遗传毒性和白细胞数量影响的变化规律和趋势。结果显示:与对照组相比,处理组出现较多微核、核固缩、核质内凹、外凸等核异常现象,存在浓度-效应关系。此外,单核细胞和中性粒细胞数量在铜暴露后比例升高。