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目的:为了研究部分凋亡抑制因子基因在同步化细胞在不同的细胞周期时相的表达情况,及其同步化引起的DNA损伤反应通路对于凋亡抑制因子基因的可能调控作用;以及P13K/AKT信号传导通路对于这些基因的表达调控作用。同时分析这些凋亡抑制因子基因的表达是否与其所在染色体存在结构或者数目的特异性变化。方法:采用无血清的饥饿培养法使细胞同步在G0期;用含羞草碱(mimosine)、胸腺嘧啶(thymidine)和噻氨酯哒唑(nocodazole)分别使细胞同步在G1期、S期和G2/M期并引起DNA损伤反应,同时加入P13K的特异性抑制剂1y294002以阻止PI3K/AKT信号传导通路。通过RT-PCR半定量法检测DNA损伤关卡通路和P13K/AKT信号通路介导的凋亡抑制因子基因mRNA在各个细胞周期相的表达情况。通过细胞遗传学的常规G式显带法,分析凋亡抑制因子基因所在的染色体是否存在特异性的异常。结果:Mimosine同步化的细胞G0/G1期达到了78.04%,Thymidine同步化的S期细胞达到62.19%,nocodazole同步化的G2/M 60.5%。细胞遗传学表明,前列腺癌细胞株DU145的染色体存在明显的结构和数目异常。对于BIRC3/AP12所在的11号染色体存在易位,如t(11;12)(q;q)。对于apollon/BIRC6基因所在的染色体2p,存在缺失或者重复,如2p~-,2p~+。对于BIRC7/Livin基因所在的染色体,存在单体,如de1(20),可能影响该基因的表达。对于融合基因API2-MALT1,可能存在其对应的染色体易位t(11,18)(q21;q21)。同步化药物激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,而促进BIRC3/AP12 mRNA的表达水平;而PI3K抑制剂1y294002则抑制BIRC3/API2 mRNA的表达。在G2/M期,ly294002对于apollon mRNA的表达水平有明显的抑制作用。结论:前列腺癌细胞株DU145的染色体存在部确定的结构和数目异常,这些异常可能影响某些基因的表达。同步化药物激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,可能再通过PI3K/Akt通路,而不是通过p 53通路,因为DU145细胞株没有功能性的p53基因和Rb基因,进一步调控BIRC3 mRNA的表达;或者在细胞周期的某个时相调控BIRC6/Apollon mRNA的表达。对于BIRC6/Apollon mRNA的表达与以前报道有矛盾之处,将希望有进一步的研究予以解释这些问题。