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目的和背景：心内直视手术中有关心肌保护的方法较多，如高钾冷晶体液灌注、高钾冷血液灌注、高钾温血液等灌注诱导心脏停搏；在手术过程中加入抑制炎症反应的药物如抑肽酶，乌司他丁等减少炎症介质的释放，也具有一定的心肌保护作用，但临床效果仍有待于提高。到目前为止，心内直视手术的安全时限仍然限于数小时以内，临床上应用的几种常见心肌保护方法都有可能产生不同程度的心肌缺血缺氧和再灌注损伤，严重者有可能会导致手术后心肌收缩乏力，心律失常等并发症。探索新的心肌保护方法是许多学者一直努力的方向。近年来有关δ阿片受体激动剂所引起的心肌保护作用受到了人们的重视。δ阿片受体具有介导缺血预处理的作用，降低心肌能量代谢，对抗氧自由基，减轻缺血再灌注损伤的作用，因而具有心肌保护作用。另外δ阿片受体还有介导动物冬眠的作用，冬眠对心肌有保护作用，心肌可以耐受缺血达几个月而能完全恢复。本实验拟对成年大耳白兔在心脏离体灌注条件下，观察δ阿片受体激动剂—DADLE（右旋2—丙氨酸，5—亮氨酸脑腓肽）能否保护成年兔的心肌少受或不受缺血再灌注所致的心肌细胞变性，坏死和心肌细胞凋亡等作用。 方法：选取健康成年日本大耳白兔30只，随机分成3组（每组10只），采用苯巴比妥钠（45mg／kg）麻醉后，进行肝素化（700u／kg），快速切取心脏置于冷PSS溶液中（按照有关文献配制），结扎上下腔静脉和肺静脉，置管结扎肺动脉，主动脉连在Langendroff模型上，用37℃氧和（95％O2，5％CO2）生理盐水灌注，30分钟后记录LVDP（左室发展压mmHg）、LDH郑州大学2003年硕士研究生毕业论文6阿片受体对离体兔心缺血再灌注损伤的保护作用（乳酸脱氢酶u/L）、CF（冠脉流量ml/min）、CK（肌酸激酶u/L）作为基础值。然后分组应用标准心麻液（组I）、标准心麻液+DADLE（右旋2一丙氨酸，5一亮氨酸脑啡肤，一种6阿片受体激动剂）（组11）、标准心麻液+纳洛酮（活体30分钟时应用）（组Hl），进行离体心脏灌注诱导心脏停搏，灌注压保持在80mmHg（109cmHZo），灌注液量为60mL，温度4℃。在34℃条件下使心肌缺血120分钟。2小时后应用37℃氧合（95%02，5%eoZ）生理盐水再灌注30分钟，记录此时的eF、口nP、LDH、CK，并与缺血前比较，观察心功能损伤和心肌酶泄漏情况。实验结束后，取左心室前壁少量心肌称重后置于干燥箱，千燥48小时后重新称重，以测量心肌细胞的含水量。含水量二（1一心肌干重/心肌湿重）x100%。取左室少量心肌放于4%戊二醛（河北医科大学电子显微镜室配制）中固定4小时以上（4℃冰箱保存），应用透射电子显微镜观察心肌细胞的线粒体、闰盘、肌丝等超微结构的改变，以了解损伤心肌细胞的形态学改变。另取左心室少量心肌放于固定液（河南省肿瘤医院流式细胞仪室配制）中应用流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡情况。 结果:在所观察的各项指标中，缺血前三组的左室发展压（LvDP）分别是:83.9士1.smmHg、84.1士1.gmmHg、82.7士1.smmHg，组间无明显差异（P>0.05）。缺血后三组的LVDP分别是:37.9士1.7mmHg、69.8士4.ommHg、23.4士3.lmmHg，组间的LVDP存在显著性差异（尸<0.05）。缺血前三组的冠脉流出液中LDH含量分别为:295.9士12.4u/L、305·3士8·4u/L、297.1幼o.3u/L，组间无明显差异（尸>0.05）。缺血后三组的LDH分别为:1884.4士37.5u/L、1272.6士59.lu/L、2764.4士27.7u/L，组间存在显著性差异（尸<0.01）。三组缺血前肌酸激酶（cK）的含量分别为:1000.0士36.0u/L、994.5士35.4u/L、1007.1士19.8u/L，各组间无显著性差异（P>0.05）。三组缺血后CK含量分别为:3220.8士135.lu/L、2167.5士146.0u/L、4363.0士134.2u/L，组间存在显著性差异（尸<0.05）。缺血后三组的含水量分别为（%）: 83.8士1.1·、82.4士1.4、84.3士1.3，各组间相比较（P<0.05）。缺血前三组的冠脉流量（CF）结果分别是:88.6士5.6（ml/min）、87·7士6.2 （ml/min）、86.1士6.4（ml/min），组间无显著性差异（P>0.05）。缺血后郑州大学2003年硕士研究生毕业论文8阿片受体对离体兔心缺血再灌注损伤的保护作用三组的冠脉流量（CF）分别为:59.3士6.0（ml/min）、71.6士7.3（ml/min）、53.6士8.0（ml/min），组间存在显著性差异（尸<0.05）。应用流式细胞仪检测三组的心肌细胞凋亡率分别为（%）:5.7士1.7、3.8士1.1、7.0土1.6，各组间存在明显差异（P<0.05）。流式细胞仪的曲线图结果显示，组2的凋亡峰低平不明显，组3心细胞凋亡数量较多，凋亡峰比较高，组1的凋亡峰则介于组2和组3之间。三组的心肌机械停止时间分别为（s）:20，5士2.3、17.3士1.5、25.1士1.7，组间存在显著性差异（尸<0.05）。三组的心肌电活动停止时间分别为:23.7士1.5、18.6士2.2三组之间差异有显著性（尸<0.05）。三组的心肌组织透射电子显微镜观察结果显示:组1的线粒体结构模糊，线粒体有轻度损伤，闰盘的间隙稍有增大，肌原纤维明带的细肌丝紊乱，有少量凋亡小体形成。组2的线粒体基本正常，个别线粒体结构模糊，闰盘正常，各种细胞连接正常，粗细肌丝未见损伤表现，未见明显的凋亡小体形成。组3(