食管鳞癌患者外周血中Th17细胞的检测及其临床意义

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【背景和目的】Th17细胞(T helper 17, Thl7)是一种由初始CD4+T细胞分化而来的效应T细胞,能特异性的产生IL-17(interleukin 17, IL-17),具有不同于Thl、Th2细胞的分化、发育调节机制。Th17细胞介导炎性反应,并参与肿瘤、自身免疫性疾病和移植物抗宿主等疾病的发生和发展,与疾病的转归和预后关系密切。RORγt是Th17细胞特异性的转录因子,调控IL-17的分泌。多种慢性炎症疾病中可见Th17细胞及其分泌的RORγt、IL-17高表达,由慢性炎症导致的肿瘤中IL-17表达也升高。食管慢性炎症反应引起的基底膜改变与食管上皮细胞异常增生相关,食管癌的发生与炎症密切相关。本实验通过检测食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例及外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中转录因子RORγt和细胞因子IL-17的表达水平,探讨Th17细胞及其特异性RORγt及IL-17mRNA的变化在食管鳞癌中的意义。【研究方法】标本来源于山东大学齐鲁医院2009年8月至2010年6月40例经手术治疗的食管鳞癌患者,所有患者术前均未经化疗或放射治疗。其中男24例、女16例,年龄34-78(平均年龄61±8.76)岁。40例健康志愿者外周血标本为对照,其中男性23例,女性17例;年龄23-68(平均年龄46±9.63)岁。流式细胞术检测Th17细胞在外周血淋巴细胞中的比例;PT-PCR检测PBMC中RORγt和IL-17mRNA的表达水平。术前取外周血4ml,肝素钠抗凝。计量数据以x±s表示,采用SPSS17.0统计软件分析,采用两样本t检验。P<0.05为有统计学意义。【研究结果】1.流式细胞术检测结果显示,食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例为(2.40%士0.55%),显著高于健康对照组外周血Th17细胞所占比例(0.84%士0.41%),差异有统计学意义(P<0.01)。2. RT-PCR检测PBMC结果表明,食管鳞癌患者外周血PBMC中RORγt、IL-17mRNA表达水平均明显高于健康对照组(P<0.01),且两者呈明显正相关(r2=0.551,P<0.01)。3.食管鳞癌患者淋巴结转移组与未转移组相比,Th17细胞、RORγt和IL-17mRNA均明显升高(P<0.05)。[研究结论]食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例显著高于健康对照组,表明食管鳞癌患者可能存在着Th17细胞高表达现象。食管鳞癌患者RORγt及IL-17 mRNA的表达水平均明显高于健康人,并且两者呈明显正相关,表明Thl7细胞特异性转录因子RORγt表达水平的增高可能促进了IL-17的高表达。淋巴结转移组RORγt和IL-17mRNA的表达均显著高于未转移组,Th17细胞及其主要转录因子RORγt及细胞因子IL-17mRNA的表达随着食管癌的进展而表达上调,提示Th17细胞参与了食管鳞癌的侵袭转移。
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