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1.一冬龄吉富罗非鱼成鱼的生长比较
本文对随机选取的192尾一冬龄吉富罗非鱼成鱼,进行主要经济性状包括体重、体长、体高的测量,并对其生长情况加以比较分析。结果显示:192尾鱼的平均体重为428.9±131.6g,平均体长为24.0±14.9cm,平均体高为8.7±1.2cm;最大个体为849.0g,最小个体为198.0g。192尾鱼中包括:雄鱼90尾,平均体重为510.2±126.7g,平均体长为24.1±2.0cm,平均体高为9.4±1.2cm;雌鱼102尾,平均体重为357.1±86.8g,平均体长为23.9±20.4cm,平均体高为8.2±0.8cm;采用SPSS15.0软件包中的一元方差(One-WayANOVA)分析雌、雄鱼之间,家系之间的生长差异,结果显示:雌、雄鱼体重、体高差异极显著(p<0.01),体长差异不显著(p>0.05);5个家系中,59家系平均体重最大,为460.9±24.6g。31家系平均体重最小,为367.8±25.6g,且两个家系之间的平均体重差异显著(p<0.05)。两个家系的平均体重与其余3个家系(22家系、25家系、49家系)相比,差异不显著。5个家系的平均体长和平均体高差异不显著。以上生长数据表明:吉富罗非鱼个体间、家系间及雌雄鱼间的生长速度存在较大差异,是需要进一步选育的良好材料。本章对主要经济性状进行测定的另一目的是:为吉富罗非鱼经济性状分子标记的筛选提供实验数据。
2.吉富罗非鱼选育群体的遗传结构及微卫星标记与经济性状的相关分析
利用罗非鱼第二代遗传图谱上的30个微卫星位点,对吉富罗非鱼选育群体中的192尾一冬龄成鱼进行遗传结构分析。结果表明:各位点的等位基因数为2~7个,片段长度150~342bp,平均杂合度0.5974,平均杂合度期望值0.6241,平均多态信息含量为0.5707。遗传结构分析结果说明:吉富罗非鱼选育群体的遗传多样性丰富。对5个家系的遗传结构和遗传分化进行分析,结果表明:5个家系各自的多态信息含量均为中度多态(PIC<0.5);5个家系的遗传分化系数(Fst)为0.1852,表明家系间具有较大的遗传分化。根据各家系之间的遗传距离,采用UPGMA法对5个家系进行聚类。5个家系可分为两类,49家系和59家系遗传距离最小先聚在一起,再与31家系构成一类;22家系和25家系聚为另一类。
最小二乘方差分析结果显示:(1)与吉富罗非鱼雌鱼体重相关的微卫星位点有3个,分别为GM041,GM542和GM304;(2)与吉富罗非鱼雄鱼体重相关的微卫星位点有4个,分别为GM041,UNH860,GM519和GM304;(3)与吉富罗非鱼雄鱼体形相关的微卫星位点只有UNH952。通过分析个体所含与体重正相关的标记的数目对体重的影响,结果表明:含有的标记越多,鱼的平均体重就越大。
此外,本文还对影子带的来源作了初步分析。对影子带和主带分别克隆、测序后发现:影子带和主带的正、反测序结果在片段大小和碱基组成上均一致;影子带和主带都是由两部分组成:表明微卫星正确大小的PCR特异扩增条带和比特异扩增条带小2bp的非特异扩增条带,2bp的差异出现在核心序列;影子带测序结果中没有发现异源双链的特殊结构,影子带的结构还需进一步的研究。
最后,本文对30个微卫星位点加以组合、筛选,并获得到4对二重PCR组合。