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研究背景：骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种内分泌性非胶原型糖基化磷蛋白,正常动脉壁中OPN几乎不表达,动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)时,OPN水平明显升高。OPN是参与血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)表型转变的重要因素,并且可以促进VSMC发生增殖和迁移。AS患者血浆中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平显著升高,且AS的程度和范围与ET-1水平呈正相关。ET-1有刺激VSMC增殖的作用,但是该作用的途径和方式还不甚清楚。在ET-1诱导增殖的VSMC中OPN是否表达、是否起作用和起何种作用,目前尚未见报道。目的：观察不同浓度的ET-1对VSMC增殖和OPN表达的影响,分析二者的相关关系,探讨OPN在ET-1诱导VSMC增殖中的作用,从而为AS发生过程中VSMC增殖的检测以及AS的防治提供新的思路。方法：1.培养人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMCs);2.分组：培养的HUASMCs随机分成5组,组1为不加ET-1的对照组,组2、3、4分别给予1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L ET-1刺激48h,组5给予10μmol/L BQ123 (ETA受体特异性阻断剂)预处理2h,再用lOnmol/L ET-1刺激48h,MTT比色法检测细胞在波长为490nm的吸光度值,组间进行比较；3.采用免疫细胞化学方法对组1、组3和组5的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达进行检测,计算并比较PCNA表达的阳性率；4.免疫细胞化学方法检测OPN在各组的表达,计算并比较OPN表达的阳性率；5.分析OPN表达与HUASMC增殖的相关关系。结果：1. 1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L ET-1刺激后,吸光度值均高于对照组(P<0.01)；2.BQ123预处理组与10nmol/L ET-1组相比,吸光度值和PCNA表达的阳性率降低(P<0.01),与对照组之间的差别无统计学意义(P>0.05)；3.随ET-1浓度的升高,OPN表达的阳性率升高(P<0.01),给予BQ123预处理后,OPN表达的阳性率低于10nmol/L ET-1组(P<0.01),而与对照组之间的差别无统计学意义(P>0.05)；4.OPN表达的阳性率与吸光度值之间存在正相关关系(r=0.963,P<0.01)。结论：1.ET-1剂量依赖性刺激VSMC增殖；2.在ET-1诱导增殖的VSMC中OPN表达增加,OPN表达和VSMC增殖之间存在正相关关系,OPN表达与VSMC表型转变互为因果,检测VSMC中OPN的表达,对于VSMC增殖情况有一定预测价值；3.BQ123可以抑制ET-1的作用,在抑制VSMC的增殖以及延缓AS的血管重构中可能具有积极意义。