【摘 要】
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目的:肠道内细菌及其基因组DNA参与多种免疫调节,但其功能存在差异,本实验研究Faecalibacterium prausnilzii(F.prausnilzii)及F.prausnilzii基因组DNA(fDNA)干预后的人外周血单
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目的:肠道内细菌及其基因组DNA参与多种免疫调节,但其功能存在差异,本实验研究Faecalibacterium prausnilzii(F.prausnilzii)及F.prausnilzii基因组DNA(fDNA)干预后的人外周血单核细胞(PBMCs)对结肠癌lovo细胞杀伤活性以及对PBMCs细胞IFN-γ和IL-4浓度和Th1、Th2类细胞特异性核转录因子T-bet、GATA3 mRNA表达的影响,初步探讨F.prausnilzii基因组DNA治疗结肠癌的免疫学机理。 方法:将F.prausnilzii、fDNA、酶解的F.prausnilzii基因组DNA(d-fDNA)与PBMCs体外共培养后,MTT法检测各干预组PBMCs对结肠癌lovo细胞的杀伤活性,ELISA法检测PBMCs培养上清液中IFN-γ和IL-4浓度;实时荧光PCR法检测Th1、Th2类细胞特异性核转录因子T-bet、GATA3 mRNA表达。 结果:与未干预的PBMCs组(26.5±6.717)%相比,fDNA组(49.43±6.774)%对lovo细胞杀伤活性有显著升高(P<0.05); F.prausnilzii组(35.73±1.967)%及d-fDNA组(28.80±5.455)%与未干预的PBMCs组相比,无统计学意义(P>0.05);fDNA组IFN-γ的分泌量(529.4±36.29)pg/mL与其它三组:F.prausnilzii组(288.6±31.01)pg/mL、d-fDNA组(220.3±20.72)pg/mL、对照组(203.2±23.61)pg/mL相比,有显著增加(P<0.001);fDNA组IL-4分泌量(14.35±2.10)pg/mL与d-fDNA组(29.57±4.92)pg/mL、对照组(30.91±3.35)pg/mL相比有统计学意义(P<0.05);fDNA组T-bet mRNA表达量(1.699±0.082)显著高于d-fDNA组(1.066±0.201)及对照组(P<0.05),fDNA组GATA3 mRNA表达量(0.511±0.077)低于d-fDNA组(1.066±0.101)及对照组(P<0.05)。F.prausnilzii组的T-bet mRNA(1.144±0.204及GATA3 mRNA(0.799±0.143)与对照组相比,均无统计学意义(P>0.05) 结论:fDNA有显著的抗肿瘤作用;其机制可能与增加PBMCs IFN-γ分泌以及核转录因子T-bet mRNA表达,上调Th1免疫应答有关。
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