【摘 要】
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1、桑叶蛋白及其多肽桑叶（Mulberry leaf）是桑科（Moraceae）植物桑树（Morus albaL.）的干燥叶,广泛分布于我国各地,为药食同源的植物之一,其中所含的多糖、生物碱、黄酮等成分具有降血糖、降血脂等作用,桑叶含有丰富的蛋白质,其氨基酸种类比较齐全,且含量比较高,是一种优质的植物蛋白质资源。近年来,多肽因生物活性、溶解性良好、易吸收等特点而吸引了众多学者研究。（1）桑叶蛋白的
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1、桑叶蛋白及其多肽桑叶（Mulberry leaf）是桑科（Moraceae）植物桑树（Morus albaL.）的干燥叶,广泛分布于我国各地,为药食同源的植物之一,其中所含的多糖、生物碱、黄酮等成分具有降血糖、降血脂等作用,桑叶含有丰富的蛋白质,其氨基酸种类比较齐全,且含量比较高,是一种优质的植物蛋白质资源。近年来,多肽因生物活性、溶解性良好、易吸收等特点而吸引了众多学者研究。（1）桑叶蛋白的提取考察了0.01mmol/L磷酸缓冲液（PBS,pH 7.2～7.4）低温超声提取桑叶蛋白的工艺:以料液比为1:40的PBS为提取溶剂,冰浴下超声提取40 min,离心取上清用0.05 mol/L HCl调pH至3,静置沉淀,将酸沉后的蛋白用透析袋透析72h,冻干,即得桑叶蛋白。（2）桑叶蛋白的酶解以桑叶蛋白酶解后的水解度来评价中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶对桑叶蛋白的水解能力强弱,筛选最优水解酶,结果发现木瓜蛋白酶的水解度优于中性蛋白酶和碱性蛋白酶。选用响应曲面法考察了加酶量、酶解时间、温度、pH对木瓜蛋白酶酶解桑叶蛋白的影响,经响应曲面优化得到最佳酶解工艺参数为:酶解时间为3.0 h,加酶量为5.20%,温度为45℃,pH为6.5,该条件下桑叶蛋白水解度为40.25%。（3）桑叶蛋白与多肽分子量的测定采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）测定桑叶蛋白酶解前蛋白亚基为64.89 KDa、52.57 KDa,桑叶肽的蛋白亚基在19.42～3.46 KDa之间连续分布;HPLC凝胶色谱法测定了桑叶蛋白的相对分子质量主要包括318.701 KDa的大分子蛋白和7.694、2.554 KDa的小分子蛋白,经木瓜蛋白酶酶解后,31 8.701KDa的大分子蛋白基本全被酶解为29.478～2.644 KDa之间的多肽,桑叶蛋白中的小部分小分子蛋白被酶解为0.585～0.237KDa 的小段肽。综上所述,优化了桑叶蛋白的提取工艺和酶解工艺,制备了桑叶多肽,通过SDS-PAGE凝胶电泳法测定了桑叶蛋白酶解前后的蛋白亚基分子量,HPLC凝胶色谱法测定了桑叶蛋白酶解前的分子量分布,为桑叶蛋白的进一步开发利用奠定了基础。2、当归化学成分的分离鉴定中药当归是伞形科（Apiaceae）植物当归属（Angelica）当归（Angelicasinensis）的干燥根,为常用的传统中药,性温、味甘、辛,具有活血补血、调理月经、润肠滑燥等功效,被冠以“药王”的美称。本课题采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、制备薄层色谱和高效液相制备色谱,对当归95%乙醇提取物进行了系统的化学成分分离,根据其理化性质和波谱数据鉴定了 22种化合物,分别为:洋川芎内酯C（senkyunolide C）（1）、洋川芎内酯 B（senkyunolide B）（2）、洋川芎内酯 F（senkyunolide F）（3）、洋川芎内酯 L（senkyunolide L）（4）、E-6,7-反式二羟基藁苯内酯（E-6,7-trans-dihydroxy-ligustilide）（5）、洋川芎内酯 R（senkyunolide R）（6）、洋川芎内酯 S（senkyunolide S）（7）、洋川芎内酯 V（senkyunolide V）（8）、欧当归内酯 A（levistolide A）（9）、E,Z’-6,6’,7,3a’-藁本内酯二聚体（E,Z’-6,6’,7,3a’-adiligustilide）（10）、（Z）-6,8’,7,3’-藁本内酯二聚体（（Z）-6,8’,7,3’-diligustilide）（11）、gelispirolide（12）、3,3’Z-6.7,7’.6’-藁本内酯二聚体（3,3’Z-6.7,7’.6’-diligustilide）（13）、阿魏酸（ferulic acid）（14）、香草醛（vanillin）（15）、对羟基苯乙醇-反式阿魏酰酯（p-hydroxyphenethyl-trans-ferulate）（16）、2-乙氧基-2-（4’-羟苯基）乙醇（2-ethoxy-2-（4’-hydroxyphenyl）ethanol）（17）、2-羟基-2-（4’-羟苯基）乙醇（2-hydroxy-2-（4’-hydroxyphenyl）ethanol）（18）、邻苯二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate）（19）、1-乙酰氧基-12,14-二炔-11,16-二醇-9,17-十八碳二烯酸（1-acetoxy-12,14-diyne-11,16-diol-9,17-octadecadiene）（20）、胡萝卜苷（daucosterol）（21）、β-谷甾醇（β-sitosterol）（22）。其中化合物4首次从该植物中分离得到,化合物8首次从该属植物中分离得到。
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