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第一部分MUC5AC及MUC5B在哮喘儿童外周血中表达的研究目的:探讨粘蛋白基因MUC5AC和MUC5B在支气管哮喘儿童外周血中表达情况。方法:选取2018年11月至2019年4月在我院诊治的36例哮喘儿童及骨科的25例儿童作为研究对象,分为哮喘组和对照组,均采取全血标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(q-RT PCR)检测血MUC5AC和MUC5B mRNA表达水平,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测MUC5AC和MUC5B的蛋白表达水平。比较哮喘组与对照组各mRNA相对表达水平及蛋白表达水平。同时分析哮喘儿童临床症状及肺功能与MUC5AC及MUC5B表达水平的关系。结果:哮喘组MUC5AC及MUC5B蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。哮喘组中,与非咳嗽组比较,咳嗽组MUC5AC蛋白水平升高(P<0.05)。结论:外周血MUC5AC和MUC5B表达与儿童支气管哮喘有关,且与哮喘相关临床特征有关,外周血MUC5AC和MUC5B表达水平也许可能作为辅助评估哮喘儿童粘液高分泌的指标。第二部分N-乙酰半胱氨酸对哮喘小鼠气道粘液高分泌及气道炎症的作用的研究目的:探究N-乙酰半胱氨酸对哮喘小鼠气道粘液分泌及气道炎症的影响。方法:选取6~8周龄的SPF级C57bl/6雌性小鼠,按随机数字表法分成3组:对照组(control),哮喘组(asthma),抗氧化剂干预组(N-乙酰半胱氨酸,N-acetylcysteine,NAC组)。通过尘螨(House dust mites,HDM)滴鼻方式致敏与激发建立哮喘模型;对照组予以生理盐水建模;自尘螨滴鼻第一天开始,NAC组在尘螨滴鼻前1小时予以腹腔注射NAC溶液直至最后一次激发结束。于末次激发24小时内,行肺功能检测,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),肺组织等实验标本。行BALF细胞总计数及炎症细胞分类计数;左肺组织病理切片行HE染色评估气道炎症;Elisa检测BALF中IL-4水平;左肺病理切片通过糖原PAS染色评估肺部粘液分泌情况;右肺组织采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)检测MUC5AC m RNA表达水平;免疫组织化学染色肺组织检测粘蛋白MUC5AC的表达情况。结果:哮喘组较对照组气道高反应性升高(P<0.01);BALF细胞总数升高(P<0.05);嗜酸性粒细胞绝对计数增多(P<0.05);气道血管周围炎症细胞浸润加重(P<0.05);BALF中IL-4增多;气道上皮细胞中粘液产生明显增多(P<0.01);肺组织MUC5AC转录水平升高(P<0.05);气道上皮MUC5AC蛋白表达升高(P<0.05)。与AS组比较,NAC组气道高反应性减轻(P<0.01);BALF细胞总数减少(P<0.05);嗜酸性粒细胞绝对计数减少(P<0.05);炎症细胞浸润程度较哮喘组减轻(P<0.05);气道上皮细胞中粘液产生明显减少(P<0.05);肺组织MUC5AC转录水平无明显差异;气道上皮MUC5AC蛋白表达减少(P<0.05)。结论:NAC对于尘螨诱导哮喘有减轻气道粘液高分泌状态及减轻气道炎症的作用。