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本工作以天然产物壳聚糖为基质,来设计、制备分子印迹聚合物以用于蛋白质和天然产物的分析分离。
在制备蛋白质分子印迹聚合物的过程中,分别采用了四种方法来制备血红蛋白分子印迹聚合物。第一种方法是采用大孔壳聚糖球和聚丙烯酰胺形成互贯网络结构来印迹血红蛋白。在这种方法中,大孔的壳聚糖球作为功能性的支持骨架,丙烯酰胺作为功能单体,得到的印迹聚合物对印迹分子血红蛋白的吸附吻合Langmuir和Freundlich吸附模型。Langmuir分析表明在印迹聚合物上形成等级吸附并计算出其平衡吸附常数和最大吸附容量。通过与化学组成相同的非印迹聚合物对比,该印迹聚合物对印迹分子具有较高的吸附容量和较好的选择性。在低浓度下,该印迹聚合物的再生性能良好。第二种方法采用马来酸酐改性的大孔壳聚糖球为载体,利用引入的乙烯基来接枝丙烯酰胺,对血红蛋白进行分子印迹。得到的印迹聚合物对血红蛋白表现出良好的选择性和较高的吸附容量,液相色谱数据表明,以该印迹聚合物为固定相,可以实现血红蛋白和血清蛋白的有效分离。第三种方法是采用壳聚糖和聚丙烯酰胺形成半互贯网络来对血红蛋白分子进行印迹。得到的印迹聚合物用热分析、差热分析、X—光衍射和环境扫描等手段进行了表征。得到的印迹聚合物对血红蛋白分子不仅具有良好的选择性,也具有较高的吸附容量。第四种方法是用壳聚糖涂层硅胶球作为介质,利用壳聚糖上的氨基来引入醛基,通过对血红蛋白分子的预固定,用表面印迹的方法来制备血红蛋白分子印迹聚合物。用该法可得到粒径均匀的印迹聚合物球,并用红外、热分析以及扫描电镜的方法进行了表征。该印迹聚合物对印迹分子血红蛋白表现出良好的选择性。
在分离银杏黄酮提取物的过程中,采用两种方法对槲皮素进行分离。第一种采用分子印迹的方法对槲皮素进行印迹来达到分离的目的。在这种方法中,以大孔壳聚糖球为功能载体,甲基丙烯酸为功能单体,在 N,N’-二甲基甲酰胺溶液中对槲皮素分子进行印迹。得到的印迹聚合物对槲皮素具有良好的选择性和较高的吸附容量。该印迹聚合物球作为液相色谱的固定相,可实现槲皮素和异鼠李素的有效分离。在第二种方法中,用烯丙基改性的寡聚壳聚糖作为大单体,二乙二醇二丙烯酸酯为交联剂制备聚合物。聚合物经粉碎、研磨沉淀分离后,得到高效液相色谱分离填料。通过采用不同的流动相可实现槲皮素和其结构相似物的分离。该材料用作固相萃取填料,可实现槲皮素的有效吸附分离。